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細胞培養基大盤點:不同種類,不同用途

發布時間:2024-06-13     發布作者:上海通蔚生物

  上篇文章為大家介紹《常見細胞培養基及選擇》。今天圍繞著細胞培養基的分類為大家詳細介紹下基礎培養基、完全培養基和無血清培養基種類。

  基礎培養基


  基礎培養基的主要成份是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質(血清、生長因子、抗生素和緩沖液)。基礎培養基種類很多,其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12是應用較為廣泛的。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。具體特征如下:


培養基 特征
應用

M199培養基

199 號培養基,通常稱為 M199,是 JF Morgan 于 1950 年開發的一種細胞培養基。有各種必需和非必需 氨基酸、葡萄糖、膽固醇、嘧啶和維生素,包括硫胺素、核黃素和生物素。

廣泛的應用范圍還擴展到生物制劑生產、藥物篩選和毒理學研究,促進了醫學和生物技術的進步。


BME培養基

BME由HarryEagle在1955年開發的,成分主要是BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。

BME是一種用于 HeLa 細胞、小鼠成纖維細胞和其他人類細胞系(如 WI-38 和 MRC-5)生長的基礎培養基

MEM培養基

由HarryEagle在1959年在基礎Eagle培養基改良的產物,它針對性地提高了BME的氨基酸濃度,使其達到BME的兩倍,并添加了一些BME中沒有的必需氨基酸,例如谷氨酰胺。同時,MEM培養基將賴氨酸和生物素的濃度降低,使其成為一種“低限量”的培養基。

MEM培養基常用于培養成纖維細胞、上皮細胞、內皮細胞等貼壁細胞,也適用于一些懸浮細胞的培養,例如:一些淋巴細胞、白血病細胞等。

DMEM培養基

DMEM是由杜爾貝克(Dulbecco)1959年在Eagle基礎培養基(MEM)上改良而成的。改良后,DMEM氨基酸和維生素的濃度提高了一倍,并補充了一些非必需氨基酸,例如甘氨酸和絲氨酸,以及鐵和丙酮酸,以滿足更多細胞的生長需求。

DMEM最初是為了培養小鼠成纖維細胞而設計的,后來被廣泛應用于各種細胞系的培養,包括腫瘤細胞。

IMDM細胞培養基

scove在1976年對Dulbecco'sMedium進行改良,創造了Iscove'sMedium,最初用于培養骨髓細胞,特別是紅細胞和巨噬細胞前體。補充了DMEM中不存在的幾種非必需氨基酸和維生素(氰鈷胺和生物素)以及額外的亞硒酸鹽、丙酮酸鹽和HEPES。添加了轉鐵蛋白、牛血清白蛋白和大豆脂質作為血清替代品。

可用于雜交瘤細胞和高密度細胞的快速培養。

RPMI-1640培養基

RPMI-1640培養基是在1967年由RPMI研制,主要研發人員是GeorgeE.Moore和HenryR.Hsiung。最初是為淋巴細胞設計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。

RPMI-1640培養基現在已經被廣泛用于培養其他類型的細胞,例如哺乳動物細胞、特殊造血細胞、雜交瘤細胞等。

Ham's F10、F12培養基

HamF10細胞培養基是由 RichardG.Ham于1963年設計,最初是為了培養 中國倉鼠卵巢細胞(CHO細胞) 而設計的,目的是在低血清濃度下實現CHO細胞的克隆化培養。Ham'sF12是第一個能夠在無血清條件下支持單個CHO細胞克隆生長的培養基。它通過添加三種純化血清蛋白(血清白蛋白、轉鐵蛋白和胰島素)代替血清,并詳細研究氨基酸和微量元素的種類和濃度,實現了這一目標。

F10適用于倉鼠、人二倍體細胞,F12適用于CHO細胞。在低血清含量下時,特別適合單細胞培養和克隆化培養,添加血清后也廣泛應用于癌細胞和原代細胞的培養,如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。

DMEM/F12培養基

DMEM/F-12培養基是由營養豐富的DMEM培養基和成分豐富的Ham'sF12培養基以1:1的比例混合而成。它結合了兩種培養基的優點,能夠提供更豐富的營養成分,也更適合在低血清或無血清的條件下培養細胞,因此可以滿足多種細胞類型的要求,例如原代培養及更難養的細胞系的培養。

廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養。同時,常作為開發無血清培養基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養以及克隆密度培養


McCoy's 5A培養基

McCoy's5A培養基是由McCoy在1959年為肉瘤細胞設計的,是改良自BasalMedium5A的一種培養基。它包含還原型谷胱甘肽、細菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖,并進行了其他成分的調整和添加,使其能夠支持多種類型的原代細胞的培養,例如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網膜等。

McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細胞的培養,如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網膜等。此外McCoy's 5A培養基還用于組織活檢培養、細胞建系,以及一些淋巴細胞和較難培養的細胞的培養。

L15細胞培養基

L-15培養基是由Moore等人在1967年設計的。最初是為了為培養 快速增殖的腫瘤細胞 而設計的,L-15培養基的主要目的,是在沒有CO2的環境下,培養快速增殖的腫瘤細胞。它采用磷酸鹽緩沖體系,并用半乳糖替代了葡萄糖,以適應無CO2環境的特點。

L-15培養基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養以及神經元的培養等



  完全培養基


  完全培養基是在基礎培養基中添加了血清、抗生素等物質,也稱為含血清培養基。其中大部分細胞培養常用的是牛血清,因為牛血清中含有促進細胞增殖的各種生長因子,例如胰島素樣生長因子(IGF)、表皮生長因子(EGF)等。此外為防止污染,培養液中通常添加一定量的抗生素,例如青霉素、鏈霉素等。

  完全培養基根據添加血清量的多少,可分為細胞生長培養基和細胞維持培養基。細胞生長培養基通常添加高濃度血清,促進細胞快速增殖;細胞維持培養基通常添加低濃度血清,維持細胞存活和功能。

  無血清培養基


  無血清培養基是指在合成培養基的基礎上引入成分明確或部分明確的血清替代成分,例如生長因子、黏附因子、激素、脂類、蛋白質等,主要由基礎培養基和添加物(替代血清的補充因子)組成。其主要成分包括以下幾類:

  黏附因子:約有80%的哺乳動物細胞是屬于貼附型生長,一般的細胞培養基是利用血清作為其來源,在無血清培養基中,細胞黏附因子是十分重要的物質,例如纖連蛋白、層粘連蛋白等。

  生長因子:生長因子是維持細胞活性與促進細胞增生、遷移、分化等,不可或缺的要素,例如表皮生長因子(EGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)等。

  酶抑制劑:貼附型細胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)進行傳代,在一般細胞培養中,血清中含有抑制胰蛋白酶的成分,例如α-1抗胰蛋白酶,所以無血清培養基必須添加胰蛋白酶抑制劑,例如大豆胰蛋白酶抑制劑或抑肽酶。

  細胞轉入無血清培養之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規培養于含血清的培養基中,并進行逐步適應,以保證細胞的特性不發生變化。

  優點

  成分明確,避免了血清成分帶來的未知影響。

  避免了血清對細胞的毒性作用和血清源性污染。

  雜蛋白含量少,避免血清成分影響研究結果或產品制程,提高產品表達水平并易于純化。

  缺點

  無血清培養基成本較高。

  并非所有的細胞都能在無血清培養基中培養。

  細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響,培養基保存和應用方面局限性很大。

  這篇文章為大家介紹了常見細胞培養基的種類,相信你對細胞培養基有所了解。培養基的選擇要結合細胞的特點及實驗的需要選擇,如有不明白可以向廠家咨詢或者查閱文獻。上海通蔚有基礎培養基、完全培養基和細胞專用培養基,如需了解,歡迎前來咨詢我們在線顧問,價格實惠,質量保障!


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