發布時間:2024-05-16 發布作者:上海通蔚生物
細胞培養基的目標是創造一個體外細胞增殖的環境。這主要通過培養箱(即溫度、濕度、O2和CO2張力)和基礎細胞培養基及其補充物來實現。細胞培養基不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質等營養物質的供應,還包含控制培養物pH值和細胞滲透壓等理化特性的成分。常見的細胞培養基包括DMEM、DMEM/F12等,它們針對不同細胞類型和實驗目的,在成分上有所差異。接下來上海通蔚生物給大家詳細介紹一下它們之間的區別。
Dulbecco's改良培養基--DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養基最初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養,例如成纖維細胞、HeLa細胞、雜交瘤細胞、原代細胞等。
DMEM/F-12培養基是將DMEM與Ham'sF-12培養基以1:1比例混合改良而來的。改良后的DMEM/F-12培養基,營養成分更為豐富,含有更多種微量元素,更適合對營養要求較高的細胞,例如一些神經元細胞、上皮細胞、內皮細胞等。它也常用于培養原代細胞,因為它能更好地模擬細胞在體內的生長環境。DMEM/F-12廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養,也適用于低血清條件下哺乳動物細胞的培養以及高密度培養。
DMEM/F-12已成功應用于各種研究領域,包括神經生物學、免疫學、癌癥研究、干細胞研究等。它已成功培養的細胞包括:
DMEM培養基富含氨基酸、維生素和碳水化合物,能夠提供細胞所需的基本營養物質。配方相對簡單,適用于大多數哺乳動物細胞的培養,特別適用于培養腫瘤細胞、原代細胞、免疫細胞和成纖維細胞等。
DMEM/F12是DMEM和NutrientMixtureF-12(N-12)的混合培養基,結合了兩種培養基的優點。含有更多的維生素、微量元素和成長因子,能夠更全面地滿足細胞的營養需求。適用于對培養基要求較高的細胞類型,如神經細胞、肝細胞、乳腺上皮細胞等。
上述是2種細胞適用性主要區分,選擇使用哪種培養基應該根據你的實驗目的、細胞類型和實驗條件來進行綜合考慮。
使用DMEM和DMEM/F12培養基時,需要注意以下幾點:
1.培養細胞類型:DMEM適用于大多數哺乳動物細胞的培養,而DMEM/F12通常適用于對培養基要求較高的細胞類型,如神經細胞、肝細胞、乳腺上皮細胞等。因此,在選擇培養基時,需要根據你要培養的細胞類型來進行選擇。
2.添加補充物質:根據具體的實驗要求,你可能需要向DMEM或DMEM/F12培養基中添加額外的補充物質,如生長因子、抗生素、抗菌劑等。添加補充物質時應遵循相關的實驗方案和標準操作規程。
3.細胞密度和培養時間:不同的細胞類型在DMEM或DMEM/F12培養基中可能具有不同的生長速率和最適生長密度。因此,在培養細胞時,需要根據細胞的生長特性和實驗要求來確定合適的細胞密度和培養時間。
4.培養條件:DMEM和DMEM/F12培養基通常需要在37攝氏度的恒溫培養箱中、含有5%~10%二氧化碳的濕潤環境下進行培養。確保培養條件的穩定性和一致性對于細胞的健康生長非常重要。
5.培養基的更換和更新:培養基中的營養物質和生長因子會隨著時間的推移而逐漸消耗和降解,因此需要定期更換和更新培養基,以維持細胞的健康生長和活力。
6.防止細菌和真菌污染:在培養細胞的過程中,需要采取嚴格的無菌操作措施,防止細菌和真菌的污染,從而保證細胞的純度和實驗結果的可靠性。
上述為大家介紹dmemf12和DMEM區別,選擇合適的培養基對于細胞培養的成功至關重要。不同類型的細胞具有不同的生長要求和對營養物質的需求,因此選擇適合特定細胞類型的培養基可以提高細胞的生長速率、增殖能力和細胞功能的穩定性,從而確保實驗結果的準確性和可重復性。