發(fā)布時(shí)間:2024-05-16 發(fā)布作者:上海通蔚生物
細(xì)胞培養(yǎng)基的目標(biāo)是創(chuàng)造一個(gè)體外細(xì)胞增殖的環(huán)境。這主要通過培養(yǎng)箱(即溫度、濕度、O2和CO2張力)和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基及其補(bǔ)充物來實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞培養(yǎng)基不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng),還包含控制培養(yǎng)物pH值和細(xì)胞滲透壓等理化特性的成分。常見的細(xì)胞培養(yǎng)基包括DMEM、DMEM/F12等,它們針對(duì)不同細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,在成分上有所差異。接下來上海通蔚生物給大家詳細(xì)介紹一下它們之間的區(qū)別。
Dulbecco's改良培養(yǎng)基--DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),例如成纖維細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、原代細(xì)胞等。
DMEM/F-12培養(yǎng)基是將DMEM與Ham'sF-12培養(yǎng)基以1:1比例混合改良而來的。改良后的DMEM/F-12培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)成分更為豐富,含有更多種微量元素,更適合對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)胞,例如一些神經(jīng)元細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。它也常用于培養(yǎng)原代細(xì)胞,因?yàn)樗芨玫啬M細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境。DMEM/F-12廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng),也適用于低血清條件下哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)以及高密度培養(yǎng)。
DMEM/F-12已成功應(yīng)用于各種研究領(lǐng)域,包括神經(jīng)生物學(xué)、免疫學(xué)、癌癥研究、干細(xì)胞研究等。它已成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括:
DMEM培養(yǎng)基富含氨基酸、維生素和碳水化合物,能夠提供細(xì)胞所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。配方相對(duì)簡(jiǎn)單,適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),特別適用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等。
DMEM/F12是DMEM和NutrientMixtureF-12(N-12)的混合培養(yǎng)基,結(jié)合了兩種培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)。含有更多的維生素、微量元素和成長(zhǎng)因子,能夠更全面地滿足細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求。適用于對(duì)培養(yǎng)基要求較高的細(xì)胞類型,如神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、乳腺上皮細(xì)胞等。
上述是2種細(xì)胞適用性主要區(qū)分,選擇使用哪種培養(yǎng)基應(yīng)該根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)條件來進(jìn)行綜合考慮。
使用DMEM和DMEM/F12培養(yǎng)基時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
1.培養(yǎng)細(xì)胞類型:DMEM適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),而DMEM/F12通常適用于對(duì)培養(yǎng)基要求較高的細(xì)胞類型,如神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、乳腺上皮細(xì)胞等。因此,在選擇培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)你要培養(yǎng)的細(xì)胞類型來進(jìn)行選擇。
2.添加補(bǔ)充物質(zhì):根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求,你可能需要向DMEM或DMEM/F12培養(yǎng)基中添加額外的補(bǔ)充物質(zhì),如生長(zhǎng)因子、抗生素、抗菌劑等。添加補(bǔ)充物質(zhì)時(shí)應(yīng)遵循相關(guān)的實(shí)驗(yàn)方案和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。
3.細(xì)胞密度和培養(yǎng)時(shí)間:不同的細(xì)胞類型在DMEM或DMEM/F12培養(yǎng)基中可能具有不同的生長(zhǎng)速率和最適生長(zhǎng)密度。因此,在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),需要根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和實(shí)驗(yàn)要求來確定合適的細(xì)胞密度和培養(yǎng)時(shí)間。
4.培養(yǎng)條件:DMEM和DMEM/F12培養(yǎng)基通常需要在37攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中、含有5%~10%二氧化碳的濕潤(rùn)環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)。確保培養(yǎng)條件的穩(wěn)定性和一致性對(duì)于細(xì)胞的健康生長(zhǎng)非常重要。
5.培養(yǎng)基的更換和更新:培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子會(huì)隨著時(shí)間的推移而逐漸消耗和降解,因此需要定期更換和更新培養(yǎng)基,以維持細(xì)胞的健康生長(zhǎng)和活力。
6.防止細(xì)菌和真菌污染:在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中,需要采取嚴(yán)格的無菌操作措施,防止細(xì)菌和真菌的污染,從而保證細(xì)胞的純度和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
上述為大家介紹dmemf12和DMEM區(qū)別,選擇合適的培養(yǎng)基對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。不同類型的細(xì)胞具有不同的生長(zhǎng)要求和對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求,因此選擇適合特定細(xì)胞類型的培養(yǎng)基可以提高細(xì)胞的生長(zhǎng)速率、增殖能力和細(xì)胞功能的穩(wěn)定性,從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。