培養(yǎng)基為細(xì)胞在體外培養(yǎng)提供生長(zhǎng)和繁殖所需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件,是生命科學(xué)研究中不可或缺工具。培養(yǎng)基按分類分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基等,不同培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)作用有截然不同。
本文將重點(diǎn)介紹基礎(chǔ)培養(yǎng)基。例如,DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一,適合大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)。深入了解基礎(chǔ)培養(yǎng)基,能夠幫助科研人員在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中選擇合適的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn),從而少走彎路,取得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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基礎(chǔ)培養(yǎng)基的種類
基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類繁多,常見的種類包括DMEM、RPMI1640、MEM和199培養(yǎng)基,它們分別用于不同細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹A私獠煌A(chǔ)培養(yǎng)基特點(diǎn),可以幫助您選擇合適培養(yǎng)基,為細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中奠定基礎(chǔ)。如果您正在選購(gòu)基礎(chǔ)培養(yǎng)基,上海通蔚提供多種優(yōu)質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,滿足您的不同需求。
DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基
DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是意大利裔美國(guó)病毒學(xué)家雷納托·杜爾貝科(RenatoDulbecco)改良的Eagle。與原始的Eagle最低必需培養(yǎng)基相比,Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基包含更高的氨基酸和維生素濃度,是其四倍。
最初的DMEM培養(yǎng)基配方包含較低濃度(1g/L)的葡萄糖和丙酮酸鈉。目前,DMEM培養(yǎng)基有多種配方可供選擇,包括高葡萄糖濃度配方和低葡萄糖濃度配方,以及含有丙酮酸鈉或不含丙酮酸鈉的配方。DMEM培養(yǎng)基采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),在5-10%的CO2環(huán)境中能夠維持細(xì)胞所需的生理pH值。為了滿足細(xì)胞的生長(zhǎng)需求,DMEM培養(yǎng)基通常需要添加胎牛血清(FBS)等添加劑。
Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可用于支持多種不同的哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)。已經(jīng)在DMEM中成功培養(yǎng)出的細(xì)胞包括原代成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、HUVEC、平滑肌細(xì)胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細(xì)胞系。
RPMI1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基
RPMI1640培養(yǎng)基是以其開發(fā)地點(diǎn)羅斯威爾公園紀(jì)念研究所命名的,它是對(duì)McCoy5A基因的改良版本,并含有更高濃度的肌醇。RPMI1640培養(yǎng)基的獨(dú)特之處在于它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。與Eagle’sMEM和DMEM不同,RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維生素B12和PABA。此外,RPMI1640培養(yǎng)基還含有高濃度的肌醇和膽堿。由于RPMI1640培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長(zhǎng)因子,因此通常需要添加10%胎牛血清(FBS)等添加劑來(lái)滿足細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。RPMI1640培養(yǎng)基采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),在5–10%CO2環(huán)境下可以維持細(xì)胞所需的生理pH值。
RPMI1640培養(yǎng)基最初是為懸浮培養(yǎng)人白血病細(xì)胞而開發(fā)的,但它被發(fā)現(xiàn)適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和癌細(xì)胞。RPMI1640培養(yǎng)基在懸浮培養(yǎng)方面表現(xiàn)出色,并且可以支持多種細(xì)胞的生長(zhǎng),因此在細(xì)胞培養(yǎng)研究中被廣泛應(yīng)用。為了滿足不同的細(xì)胞培養(yǎng)需求,RPMI1640培養(yǎng)基有多種改良配方可供選擇,您可以使用培養(yǎng)基選擇工具查找適合您的配方。
MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基
MEM(MinimumEssentialMedium,最低必需培養(yǎng)基)最初由科學(xué)家HarryEagle基于他之前設(shè)計(jì)的Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)進(jìn)行改良和優(yōu)化而來(lái),它將BEM中的成分簡(jiǎn)化為更基本的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。MEM培養(yǎng)基被稱為"最低必需",因?yàn)樗话S持細(xì)胞基本生長(zhǎng)所需的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使細(xì)胞能夠在體外環(huán)境下存活和繁殖。與BME相比,MEM培養(yǎng)基含有更高的氨基酸濃度。MEM培養(yǎng)基可以使用厄爾鹽或漢克斯鹽配制,分別用于維持CO2培養(yǎng)箱或大氣環(huán)境下的pH值。由于MEM培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長(zhǎng)因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)等添加劑來(lái)滿足細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。
MEM可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纖維細(xì)胞和原代大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞等。MEM培養(yǎng)基能夠有效支持多種細(xì)胞的生長(zhǎng),并且具有較高的性價(jià)比,因此在細(xì)胞培養(yǎng)研究中被廣泛應(yīng)用。
M199基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Medium199基礎(chǔ)培養(yǎng)基,通常簡(jiǎn)稱為M199,是由J.F.Morgan于1950年開發(fā)的一種細(xì)胞培養(yǎng)基。最初,M199是為了研究雞胚成纖維細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求而開發(fā)的。M199具有廣泛的物種適用性,特別適用于培養(yǎng)非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。M199廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶狀體組織的原代外植體的體外培養(yǎng)。
與其他基礎(chǔ)培養(yǎng)基相比,M199含有獨(dú)特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和多種維生素。M199含有Earle鹽,適用于CO2培養(yǎng)箱。M199不含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長(zhǎng)因子。M199使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(2.2g/L),因此需要在5-10%CO2環(huán)境下才能維持細(xì)胞所需的生理pH值。
M199培養(yǎng)基在培養(yǎng)非轉(zhuǎn)化細(xì)胞方面表現(xiàn)出色,并且可以支持多種細(xì)胞的生長(zhǎng),因此在細(xì)胞培養(yǎng)研究中被廣泛應(yīng)用。
如何選購(gòu)基礎(chǔ)培養(yǎng)基
選擇基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí),需要綜合考慮細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮统杀拘б妗?br />
對(duì)于購(gòu)買的新細(xì)胞株,可以咨詢出售單位,了解其推薦的培養(yǎng)基信息。
對(duì)于特定實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞,可以查閱相關(guān)文獻(xiàn),參考他人的經(jīng)驗(yàn),根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的培養(yǎng)基。
如果缺乏相關(guān)文獻(xiàn)支持,可以嘗試使用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),進(jìn)行生長(zhǎng)曲線或集落形成等指標(biāo)分析,根據(jù)結(jié)果選擇合適的培養(yǎng)基。
對(duì)于重要的實(shí)驗(yàn),在選擇細(xì)胞培養(yǎng)基上,可以選擇一些口碑較好的公司所產(chǎn)的培養(yǎng)基,或者是目標(biāo)細(xì)胞出售單位配套的培養(yǎng)基,一般這樣可以避免由于培養(yǎng)基質(zhì)量問(wèn)題帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)誤差,給實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行奠定基礎(chǔ)。
建議在選擇基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí),可以參考以下建議:
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了解常用基礎(chǔ)培養(yǎng)基的特點(diǎn)和適用范圍,例如DMEM、RPMI1640、MEM等。
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注意培養(yǎng)基的批次差異,建議使用同一批次培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
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確保培養(yǎng)基的滅菌質(zhì)量,建議使用專業(yè)的滅菌設(shè)備和方法。
上述為大家介紹了常見基礎(chǔ)培養(yǎng)基,相信你對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基有所了解。如果您對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基還有疑問(wèn)或者選購(gòu),歡迎前來(lái)咨詢。