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一文解鎖ELISA檢測方法

發布時間:2023-11-09     發布作者:上海通蔚生物

  對于剛接觸這方面科研類的人群對ELISA檢測比較陌生,那么,ELISA檢測方法有哪些?今天由通蔚生物為大家詳細介紹一下。

  ELISA又叫酶聯免疫吸附測定法(英文簡稱,ELISA)的簡稱。它是在免疫酶技術基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術。


ELISA檢測


  認識免疫酶技術?


  免疫酶技術是一種免疫檢測技術,它結合了抗原抗體反應的特異性和酶有效催化反應的專一性。該技術將酶與抗體或抗原結合成酶標記抗體或抗原,此結合物既保留了抗體或抗原的免疫學活性,同時又保留了酶對底物的催化活性。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。

  ELISA檢測方法4種方法


  • 直接法(Direct ELISA):將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量。此一級抗體的特異性非常重要。
     優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。
  • 間接法(Indirect ELISA):此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
     優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它多的免疫反應性。缺點:交互反應發生的幾率較高。
  • 雙抗體夾心法(Sandwich ELISA):被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。
  • 競爭法(Competitive ELISA):此方法整體敏感性和專一性都較差。


ELISA檢測方法


  檢測過程注意事項:


  1.   操作要規范,以減少交叉污染和誤差。
  2.   確保所有試劑和設備均處于良好狀態。
  3.   標準曲線的構建和測定要精確,以保證待測樣品的濃度準確。

  上文由通蔚生物為大家介紹了ELISA及檢測方法,希望對您在ELISA檢測過程有所幫助。如果對上文還有疑問不懂可以和通蔚在線客服溝通,我們會幫您解答。


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