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細節決定成敗:胎牛血清解凍的常見方法

發布時間:2024-04-08     發布作者:通蔚生物

    胎牛血清(FBS)是從胎牛全血中離心分離出來的血清,是培養細胞的理想營養來源,因為它含有蛋白質、脂質、鹽、維生素、礦物質、氨基酸和生長所需的其他成分。血清產品解凍不當不僅會降低其即時和長期穩定性,還會降低其有效性。那么,胎牛血清怎么解凍?下面由通蔚生物來詳細的介紹一下。

  胎牛血清

圖1.胎牛血清

    胎牛血清解凍前準備

  
    1、檢查血清: 確認血清包裝完好,標簽信息清晰,包括批號、有效期等。
  
    2、準備材料: 75%酒精,無菌吸管或移液器,無菌離心管或其他合適的容器。
  
    3、清潔工作臺: 用75%酒精擦拭工作臺面和所有將要使用的器材,確保無菌操作環境。
  

    胎牛血清解凍方法及注意事項

  
    胎牛血清解凍分為緩慢解凍法和快速解凍方法。緩慢解凍方法是這是最推薦的方法,可以最大程度地保證血清的質量。步驟如下:
  
    ①、通常的做法是將血清從-20°C的冰箱中取出,放在2-8°C的冰箱中過夜解凍。
  
    ②、再將血清置于室溫下使之全部融解,在融解過程中需及時規則地輕柔混勻。血清在溶解過程中可能會析出絮狀物,這些成分主要是血清中的纖維蛋白,是正常現象,對后續的培養無害,不需去除。
  
    ③、解凍后處理:
  
    分裝: 將解凍后的血清分裝到無菌的離心管或其他合適的容器中,每份的量根據實驗需求決定。
  
    標記: 在分裝后的容器上標記日期、批號等信息。
  
    儲存: 將分裝后的血清置于2-8°C冰箱中儲存,或根據需要進行過濾除菌等操作。
  
    注意事項:在融化過程中需不斷輕柔搖晃均勻(小心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發作。
  
    快速解凍
  
    所謂快速解凍法是將血清放在37°C的水浴中解凍。快速解凍步驟如下:
  
    ①、在水浴鍋中注入足夠的水,使產品浸入接近血清水平的位置。請勿將瓶子浸入螺紋蓋中。
  
    ②、將每個瓶子放入 37° 水浴中。
  
    ③、每 10 分鐘輕輕旋轉或搖動瓶子,直至血清完全解凍,或在解凍時使用搖動水浴搖動血清。
  
    ④、完全解凍后旋轉瓶子以達到均勻性。
  
    ⑤、解凍后處理:
  
    分裝: 將解凍后的血清分裝到無菌的離心管或其他合適的容器中,每份的量根據實驗需求決定。
  
    標記: 在分裝后的容器上標記日期、批號等信息。
  
    儲存: 將分裝后的血清置于2-8°C冰箱中儲存,或根據需要進行過濾除菌等操作。
  
         注意事項
  
    整個操作過程中保持無菌環境。
  
    避免反復凍融,解凍后的血清應盡快使用。
  
    避免劇烈搖晃,以免血清蛋白變性。
  
    解凍時間根據血清體積調整,確保血清完全解凍。
  

    注意水浴鍋溫度不要超過 37°C,以免影響血清質量。


            不同胎牛血清解凍方法優缺點對比

  
    緩慢解凍(2-8°C 解凍)
  
    優點:
  
    最大程度保證血清質量: 溫度變化緩慢,對血清中蛋白質、生長因子等成分的影響最小,可以最大程度地保留血清活性。
  
    操作簡單方便: 只需將血清從 -20°C 冰箱轉移到 2-8°C 冰箱即可,無需額外設備或操作。
  
    缺點:
  
    解凍時間長: 通常需要過夜或更長時間才能完全解凍,不適合緊急情況。
  
    快速解凍(37°C 水浴解凍)
  
    優點:
  
    解凍速度快: 短時間內即可完成解凍,適合緊急情況。
  
    操作相對簡單: 只需準備 37°C 水浴即可。
  
    缺點:
  
    可能影響血清質量: 溫度變化較快,可能導致部分蛋白質變性或活性降低,對血清質量有一定影響。
  
    需要更仔細的操作: 需要控制水浴溫度和時間,避免水浴污染等問題。
  
    總結:
  

    上述是胎牛血清怎么解凍的方法推薦,關于胎牛血清比較推薦緩慢解凍法,可以最大程度保證 血清的質量。因為篇幅有限,上述內容僅供參考,如果您對胎牛血清解凍還有疑問,可以尋求我們在線顧問一對一解答!


  

  
    
   


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