發布時間:2024-01-23 發布作者:上海通蔚生物
抗原抗體反應或抗原抗體相互作用是免疫反應過程中白細胞B細胞產生的抗體與抗原之間發生的一種特殊的化學相互作用。凝集過程結合了抗原和抗體。
這是身體用來防御各種外來顆粒(如病毒及其有毒化學物質)的基本生物過程。當抗體與抗原特異性且強烈地結合時,血液中會形成抗原-抗體復合物。免疫復合物隨后被轉移到細胞系統中,在那里它可以被消除或失活。
(Anti=相反;gen=導致的任何事物)
免疫原是任何外來物質,一旦進入我們的身體,通常會引起一系列免疫反應。而其他分子(稱為半抗原)則需要其他分子(載體蛋白)的幫助才能激活免疫反應。所有的免疫原和半抗原都稱為抗原。
抗體是免疫系統響應抗原而產生的成分。因此,抗原導致抗體的產生。它們共同作用以表現出免疫反應。抗體的一般特征如下:
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抗原和抗體彼此特異性結合。抗原抗體反應是用于描述它們之間相互作用的術語。Ag-Ab反應是它的常見縮寫。它們是體液或抗體介導的免疫的基礎。
這些反應是檢測特異性和非特異性抗原(例如引起非特異性疾病的酶)的基礎。體外發生的血清學反應稱為Ag-Ab反應。
Ag和Ab之間的相互作用分為三個階段。
親和力:它是一個比親和力更普遍的概念。它代表Ag-Ab復合物的總強度。這取決于:
1.抗體的親和力
2.抗體和抗原價(結合位點的數量)
3.表位和互補位的結構排列方式。
交叉反應性:該術語描述抗體與其他抗原上的相似表位結合的能力。
抗原抗體反應的類型如下:
當可溶性Ag與其Ab在特定pH值和溫度下、電解質(NaCl)存在下結合時,會產生Ag-Ab復合物的不溶性沉淀。沉淀素是引起沉淀的抗體,該反應稱為沉淀反應。
沉淀反應發生在液體和凝膠介質中。
復雜的Ag或Ab制劑中會出現多個條帶。它們分為兩種方法:單擴散和雙擴散。
當某種銀與其抗體在適當溫度和pH值的電解質存在下結合時,顆粒會聚集或凝集。由血清抗體形成的細胞Ag團塊稱為凝集素。
凝集原是聚集顆粒抗原的名稱。
保留不含抗血清的對照管。將管孵育直至可觀察到凝集。表現出最高凝集的試管稱為滴度。
載體顆粒表面涂有銀,有助于將沉淀過程轉變為凝集反應,從而使反應更加靈敏。紅細胞、乳膠顆粒或膨潤土可用作載體顆粒。有時,可能會使用曬黑的紅細胞(聚苯乙烯涂層紅細胞)。
紅細胞或微生物的裂解需要一些非特異性、不穩定的新鮮血清成分(稱為補體)。
每個人都有構成補體系統的11種蛋白質。它們附著在Ag-Ab復合物中Ab的Fc亞基上。補體固定測試利用Ag-Ab復合物固定補體的能力。
第一步,將測試抗原和抗血清加熱至56°C以滅活補體,并與已知量的補體結合。將其在4°C下孵育18小時。
如果血清中含有針對Ag的特異性抗體,則會形成Ag-Ab復合物并固定補體。
熒光是吸收特定波長的光線并發射不同波長的光線的能力。
當暴露于紫外線輻射時,熒光染料會發出強烈的可見光。
1942年,Albert Coons及其同事演示了標記染料如何與抗體偶聯,從而可以使用這些標記染料檢測抗原。
常用的染料包括:
免疫熒光操作中最常用的標記是熒光素,這是一種吸收藍光(490 nm)并發出強烈黃綠色熒光(517 nm)的有機染料。
作為強烈的紅色熒光發射體和有效的光吸收劑(比熒光素有效30倍),藻紅蛋白通常用作免疫熒光的標記物。
ELISA–酶聯免疫吸附測定
1971年,酶標記的Ag和Ab被創建為用于檢測抗體和抗原的血清學試劑。
與放射免疫分析(RIA)相比,它們更簡單、靈敏、價格實惠且無風險。
所使用的配體是與過氧化物酶、β-半乳糖苷酶、堿性磷酸酶等酶共價連接的分子,并且能夠檢測抗體。
ELISA共有三種類型:
間接ELISA:可以使用間接ELISA方法檢測HIV。微量滴定板的表面涂有利用重組技術開發的包膜蛋白。當添加可疑血清時,未結合的蛋白質被洗掉。
夾心ELISA:該方法用于確定樣品中是否存在Ag。在孔涂有Ag特異性抗體后,添加可疑血清并給予反應時間。通過清洗將未結合的Ag從孔中去除。
下一步是針對不同的Ag表位添加標記的Ab。洗滌用于去除未結合的抗體,然后添加有色底物并顯色。顏色強度與血清中的Ag濃度成正比。
競爭性ELISA:競爭性ELISA是估計抗原濃度的另一種變體。在此方法中,抗體最初在溶液中與含有抗原的樣品一起孵育。
然后用抗原-抗體混合物填充抗原包被的微量滴定孔。
當樣品中存在更多抗原時,可附著在抗原包被孔上的游離抗體將會減少。在間接ELISA中,添加涂有針對一抗同種型的酶的二抗(Ab2),可用于估計每個孔中附著的一抗數量。
因此,我們通過對抗原抗體反應的簡要概述來結束本次討論。抗體和抗原之間的特異性相互作用導致組合,稱為抗原-抗體反應或抗原-抗體相互作用。
相關閱讀《認識免疫學試驗——酶聯免疫吸附測定 (ELISA)》
Q1
抗原有哪三種類型?
抗原可分為三類。外源性(宿主免疫系統的外來物)、內源性(由宿主細胞內繁殖的內部細菌和病毒產生)和自身抗原(由宿主產生)是描述抗原的三種基本技術。
Q2
抗原是由什么組成的?
肽、蛋白質和多糖組成抗原。抗原可以是細菌或病毒的任何成分,包括涂層、表面蛋白、毒素、莢膜和細胞壁。
Q3
抗體有哪五種類型?
根據構成這些區域的五種不同類型的鏈恒定區,抗體(免疫球蛋白)分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。它們分布在全身各處并具有多種功能。