發布時間:2024-09-02 發布作者:上海通蔚生物
ELISA可以應用疾病診斷測定,用于識別血液中是否存在特定抗原或抗體。在微孔板上進行的ELISA實驗操作。它使用與易于測定的酶連接的抗體。血清樣本中的抗原與與酶連接的特定抗體結合。在最后一步中,添加特定底物與酶發生反應。酶將底物轉化為有色或產生信號的產物。化學底物的顏色變化揭示了血清樣本中特定抗體的存在。直接ELISA測試僅使用與酶連接的一抗。與抗原結合后,它會迅速改變顏色,表明血液中存在傳染性病原體。但是,由于表位僅限于抗原結合,因此直接ELISA中的信號強度較弱。因此,與間接ELISA相比,直接ELISA的靈敏度較低。
ELISA可以使用兩種類型的抗體進行,即:一抗和二抗。間接ELISA 使用兩種類型的抗體來放大信號以便更好地檢測。抗原通過孵育被動附著到孔上,洗滌后,將抗原特異性抗體(一抗)與抗原一起孵育。清洗孔并通過添加與酶共價連接的抗物種抗體(二抗)來檢測結合的抗體。二抗對于產生所添加的第一抗體的物種具有特異性。間接ELISA比直接ELISA更靈敏。然而,由于二抗的交叉反應,間接ELISA可能會產生非特異性信號。
直接ELISA與間接ELISA區別 |
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與間接 ELISA 相比,直接 ELISA 的靈敏度較低。 |
間接 ELISA 靈敏度更高。 |
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花費時間 |
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直接 ELISA 測試是一個快速的過程。 |
間接 ELISA 比較耗時。 |
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抗體使用 |
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直接 ELISA 僅使用一種抗體(一抗)。 |
間接 ELISA 需使用一抗和二抗。 |
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與酶的聯系 |
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一抗與酶相連。 |
二抗與酶相連。 |
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第二抗體的交叉反應 |
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直接 ELISA 消除了二抗的交叉反應。 |
間接 ELISA 會受到二抗交叉反應的影響。 |
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信號 |
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與間接 ELISA 相比,信號較弱。 |
間接ELISA法中信號被放大,因此很容易檢測。 |