ELISA的主要常用類型及步驟
發(fā)布時(shí)間:2023-05-08 發(fā)布作者:通蔚
ELISA的主要常用類型及步驟
1. 間接法測抗體
間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
1》將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2》加稀釋的樣本,保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3》加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4》加底物顯色。