對于實驗室搞科研的小伙伴第一次接觸細胞培養會緊張又興奮，害怕自己會出錯。今天，上海通蔚生物在這里為大家科普一下細胞培養基礎知識，希望可以幫助您在科研之路少走些彎路。

  什么是細胞培養

  細胞培養（cell culture）是指從動物或植物中取出細胞，然后在人工環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等）中培養以進行科學研究。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學正規的名詞叫細胞培養技術。細胞培養技術是直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離，也可以來源于已建立的細胞系或細胞株。

  培養細胞類別哪些？

  細胞培按類別可分為動物細胞培養、植物細胞培養和微生物細胞培養三類，下面參考表格：

  請注意，這只是對細胞類別培養及其特點的一個簡化概述，具體的培養條件和應用領域可能因具體的細胞類型和實驗目的而有所不同。

  細胞培養要注意事項

  細胞培養要注意在無菌環境下、合適的溫度、適宜的滲透壓和氣體環境與PH等。

  1、無菌環境。在進行人工環境下首先要注意是無菌五毒，這樣可以保證細胞在人工環境下生長繁殖。

  2、合適的溫度。環境溫度是影響細胞生長的一個重要條件。細胞培養條件一般36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細胞正常代謝會收到影響，甚至死亡。

  3、合適的滲透壓。滲透壓，本質是溶液中溶質微粒對水的吸引。高滲溶液或低滲溶液會引起細胞發生褶皺、腫脹、破裂。在人工環境培養細胞理想的滲透壓為260～320mmol/L，一般來說適合大多數細胞。

  4、氣體環境和PH值。當細胞內部的PH值偏離正常范圍時，它會導致構象酶發生變化，從而會影響細胞內部的酶活性，嚴重影響細胞的代謝和生長發育。大多數細胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養中，以5%的二氧化碳氣體比例為宜。

  細胞培養步驟

  細胞培養步驟分為細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存

  復蘇

  復蘇是從低溫保存狀態中將細胞喚醒并重新引入正常生長環境的過程。這通常涉及從液氮或-80℃冰箱中取出細胞凍存管，迅速將其放入37℃水浴中融化，然后轉移細胞至含有適當培養基的培養皿或培養瓶中。復蘇過程中需要確保細胞快速而均勻地受熱，以減少冰晶對細胞的潛在傷害。復蘇后的細胞需要被放置在培養箱中，在適當的溫度和濕度條件下培養，以便它們能夠重新適應并恢復生長。

  傳代

  傳代是當細胞在培養中增殖到一定密度時，將其分離并轉移到新的培養基中以繼續生長的過程。這通常涉及使用胰蛋白酶或其他消化酶將細胞從培養皿或培養瓶底部分離下來，然后將其重新懸浮在培養基中，并分配到新的培養容器中。傳代的目的是防止細胞因過度增殖而接觸抑制，從而保持細胞的活力和增殖能力。傳代過程中需要仔細操作，以避免對細胞造成過度機械應力或污染。

  凍存

  凍存是將細胞保存于低溫環境中，以便長期保存和后續使用的過程。這通常涉及使用含有細胞凍存液（如DMSO）的培養基，將細胞逐漸降溫至-80℃或更低，然后將其轉移到液氮中長期保存。凍存過程中需要嚴格控制降溫速率，以減少細胞內冰晶的形成，從而保護細胞的完整性和活性。凍存的細胞可以在需要時復蘇并重新引入培養，以進行后續實驗。

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