elisa試劑盒對于搞科研的人來說還是比較神秘，elisa試劑盒來的時候就是一個盒子，這個盒子到底有什么神奇的地方呢？又有哪些部分組成？具體操作流程有哪些？下面跟隨上海生蔚一起來了解一下吧！

  ELISAKIT的基本組成

elisa試劑盒

  酶標板：用于抗原-抗體復合物的孵育和洗滌。

  酶標抗體：與待測樣本中的抗原特異性結合的抗體，通常采用辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）標記。

  酶標二抗：與酶標抗體結合的特異性抗體，用于增強信號。

  底物：用于顯色反應的化學物質，如TMB（四甲基聯苯胺）或ABTS（二氨基聯苯胺）。

  終止液：用于停止顯色反應的液體，通常是硫酸。

  洗滌液：用于清洗酶標板上的未結合物質。

  說明書：包含操作指南和注意事項。

  ELISAKIT操作流程

elisa試劑盒操作步驟

  準備工作：將所需試劑從冰箱中取出，恢復至室溫。準備一塊干凈的酶標板，根據實驗設計設置合適的孔數和加樣位置。

  加樣：根據說明書要求，將待測樣本和標準品加入酶標板上的相應孔中。通常采用自動加樣器或手工滴加。

  孵育：將酶標板封閉后，在恒溫條件下孵育一定時間，使抗原-抗體復合物形成。

  洗滌：用洗滌液清洗酶標板，去除未結合的物質。

  加酶標抗體：將酶標抗體加入酶標板上的相應孔中，封閉后再次孵育。

  洗滌：用洗滌液清洗酶標板，去除未結合的酶標抗體。

  加底物：將底物加入酶標板上的相應孔中，孵育一定時間后顯色。

  終止反應：用終止液停止顯色反應。

  檢測：用酶標儀讀取各孔的光密度值，記錄數據并進行分析。

  數據處理與分析：根據所得數據計算待測樣本的濃度或活性。可以參考說明書提供的標準曲線或計算公式進行計算。

  結果報告：根據實驗目的和要求，撰寫實驗報告并提交結果。

  上海通蔚提醒，在使用ELISA試劑盒時，需要注意以下操作事項：

  仔細閱讀試劑盒說明書，了解試劑盒的原理、操作步驟和注意事項。

  實驗室環境應保持清潔，避免污染試劑盒。

  所有試劑在操作前需要充分混勻，避免沉淀或分層。

  加樣時，應按照說明書要求，使用自動加樣器或手工滴加。

  孵育時間應按照說明書要求進行，以確保抗原-抗體復合物充分形成。

  洗滌要充分，每孔洗液加樣過少或殘留都會導致顯色過快，同時背景較高。

  手洗板時所用槍頭懸空加入洗液，避免洗液污染。

  剩余酶標板條應及時放入干燥袋，避免受潮。

  試劑盒保存條件應嚴格按照說明書要求進行，過高的溫度或過低的冷藏溫度都會導致試劑盒敏感性下降。

上述是上海通蔚介紹的ELISA試劑盒的基本組成和操作流程，在操作試劑盒過程務必要注意事項，避免導致實驗過程導致讀數出現誤差。