ELISA試劑盒在國內(nèi)有很多叫法，例如ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等...那么，elisa試劑盒是用來干什么的呢？ELISA試劑盒是一種常用的實驗室免疫分析技術(shù)，用于檢測各種生物分子，如抗體、抗原、蛋白質(zhì)和細胞因子。ELISA試劑盒其高靈敏、可操作性高等優(yōu)勢廣泛應(yīng)用于科研、醫(yī)療、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域。下面上海通蔚生物詳細為大家介紹下酶聯(lián)免疫試劑盒原理、用途、種類、使用方法及購買指南。帶您全面了解ELISA試劑盒。

圖1 通蔚生物elisa試劑

  目錄：

  1.酶聯(lián)免疫試劑盒原理

  2.酶聯(lián)免疫試劑盒用途

  3.酶聯(lián)免疫試劑盒種類

  4.酶聯(lián)免疫試劑盒的使用方法

  5.酶聯(lián)免疫試劑盒選擇

  一、酶聯(lián)免疫試劑盒原理

ELISA是一種利用特異性抗體（或抗原）捕獲樣品中的目標抗原（或抗體），并利用酶與其底物的反應(yīng)檢測/定量目標分子的方法。該方法原理是將抗原或抗體吸附到固相載體表面，然后加入酶標記的二抗，形成酶標抗原-抗體復(fù)合物。當?shù)孜锶芤杭尤氲椒磻?yīng)體系中時，底物在酶的催化下發(fā)生化學反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。通過檢測顏色變化，可以確定是否存在待檢測的抗原或抗體。根據(jù)其原理，該檢測又分為直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA、競爭性ELISA等。

圖2 為底物在酶的催化下發(fā)生化學反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化

  二、酶聯(lián)免疫試劑盒用途

  Elisa試劑盒用于檢測各種生物分子，如抗體、抗原、蛋白質(zhì)和細胞因子。其主要應(yīng)用如下：

  1.抗體檢測：ELISA試劑盒可用于檢測體液中的特定抗體，如病毒抗體、抗細胞自身抗體等，對于疾病的診斷、感染的篩查以及免疫學研究非常重要。

  2.抗原檢測：試劑盒也可用于檢測樣品中的特定抗原，如病原體抗原、腫瘤標志物等，這在疾病的早期診斷、藥物治療監(jiān)測以及流行病學調(diào)查中具有重要意義。

  3.蛋白質(zhì)檢測：試劑盒可用于定量檢測樣品中特定蛋白質(zhì)的濃度，如細胞因子、酶類、激素等，對于生物學研究、臨床診斷和藥物研發(fā)等都具有重要的應(yīng)用價值。

  4. 細胞因子檢測：試劑盒還可用于檢測樣品中的細胞因子，如白細胞介素、干擾素等，這對于炎癥反應(yīng)的評估、免疫調(diào)節(jié)研究以及免疫治療監(jiān)測具有重要意義。

  除此之外，ELISA試劑盒還可以提供定量測定目標物質(zhì)的濃度，通過與標準曲線的比較，可以獲得準確的目標物質(zhì)濃度數(shù)據(jù)。這一特性使得其在藥物開發(fā)和藥物篩選、環(huán)境監(jiān)測、食品安全檢測、病毒學研究和植物學研究等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。

  三、酶聯(lián)免疫試劑盒種類

  ELISA試劑盒種類繁多，根據(jù)檢測目標分為，ELISA試劑盒的常見的種類：

  1、細胞因子檢測試劑盒：

  如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等。

  2、肝纖維化檢測elisa試劑盒：

  如纖維連接蛋白，透明質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等。

  3、心肌檢測elisa試劑盒：

  如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應(yīng)蛋白等等。

  4、內(nèi)分泌檢測elisa試劑盒

  如甲狀腺,胰腺,性激素,孕酮,睪酮,生長激素,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,雌二醇，雌三醇，5-羥色胺，17-羥孕酮等。

  5、自身免疫檢測elisa試劑盒：

  如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體(ENA),抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細胞抗體,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰瘡,蛋白酶,抗組蛋白抗體,粒細胞彈性蛋白酶,皮膚抗體,腎上腺抗體,腎小球基底膜,腎小球基底膜抗體,髓過氧化物酶,條紋肌抗體,網(wǎng)硬蛋白抗體,胃壁細胞抗體,胃蛋白酶,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,細菌性滲透性增強因子等。

  6、標志物檢測elisa試劑盒：

  如腫瘤標志物，組織多肽抗原，腫瘤相關(guān)因子，胰腺癌，直腸癌，細胞角蛋白片段，胃腸癌，鐵蛋白，糖鏈抗原，神經(jīng)異性稀醇化酶，上皮膜抗原，人抗小鼠抗體，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，大腸癌，肺癌，大小便隱血檢測，癌胚抗原，β-2。

圖3 通蔚白介素試劑盒

  四、酶聯(lián)免疫試劑盒的使用方法

  elisa試劑盒操作步驟：

   試劑準備

  1.使用前將所有試劑平衡至室溫。

  2.洗液：如果濃縮液中已經(jīng)形成結(jié)晶，平衡至室溫，并輕輕地搖晃直到結(jié)晶*溶解。加入去離子水或蒸餾水稀釋20ml濃縮洗滌液至500ml。

  3.底物溶液：顯色試劑A和B應(yīng)該在使用前15min以等體積混合。避光保存。每孔需要200ul生成的混合物。

  4.IL-6標準品：使用5ml標準稀釋液RD5T(適用于細胞培養(yǎng)上清液樣本)或標準稀釋液RD6F(適用于血清/血漿樣本)重新配制IL-6標準品。重新配制的產(chǎn)品為300pg/ml貯存液。稀釋前允許將標準品至少輕輕攪拌15min。

  5.吸取適當?shù)臉藴氏♂屢?/span>667ul到pg/mlEP管，500ul稀釋液到其它EP管中。適用貯存液配制一系列的稀釋液(如下)。進行下一次轉(zhuǎn)移前充分地混勻各個EP管。沒有稀釋的標準品作為高標準。適當?shù)臉藴氏♂屢鹤鳛?/span>0標準(0pg/ml)。

  注意：使用時戴眼睛、手、臉和衣服的防護。

  elisa試劑盒的注意事項：

  1.elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

  4.elisa試劑盒請每次測定的同時做標準曲線，好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

  8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

  五、酶聯(lián)免疫試劑盒選擇

  elisa試劑盒選擇對實驗結(jié)果準確性是至關(guān)重要的，在選購elisa試劑盒選擇可以從以下幾個方面來選擇：

  1.選擇靈敏度合適的試劑盒：靈敏度是檢測目標分子的最低濃度的能力。如果您需要檢測低濃度的目標分子，那么選擇高靈敏度的試劑盒是必要的。

  2.選擇特異性好的試劑盒：特異性是指試劑盒只對特定目標分子產(chǎn)生反應(yīng)的能力。選擇特異性好的試劑盒可以避免假陽性結(jié)果。

  3.選擇有良好重復(fù)性的試劑盒：重復(fù)性是指相同樣本在不同時間或不同實驗室條件下得到相同結(jié)果的能力。選擇有良好重復(fù)性的試劑盒可以確保實驗結(jié)果的可靠性。

  4、選擇技術(shù)支持和服務(wù)商家：優(yōu)質(zhì)品牌的試劑盒制造商通常提供全面的技術(shù)支持和服務(wù)，包括使用指導、售后服務(wù)等。這些支持可以幫助您更好地進行實驗操作，提高實驗效率。

  上海通蔚生物一直致力于研發(fā)生產(chǎn)高質(zhì)量的科研試劑，對每一批產(chǎn)品實行嚴格的質(zhì)控，嚴格控制批間差和批內(nèi)差，為生命科學提供全面的免疫檢測相關(guān)產(chǎn)品！