ELISA,全稱酶聯免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)。在生物學免疫實驗方法中常見的技術。這種技術廣泛應用于生物學、醫學、食品安全、環境檢測和藥物帥選等領域。
ELISA基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體上,通過酶標記的抗原抗體反應進行檢測。那么,elisa有哪些主要類型呢?
在酶聯吸附測定實驗中,elisa主要類型有直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA和夾心ELISA。比較常用的是夾心ELISA和競爭ELISA。上海通蔚針對這兩種類型重點為大家介紹下區別。如果你想了解ELISA其它類型,可以參考《elisa試劑盒有哪幾種類型?elisa四類型圖解》。
Elisa夾心法
Elisa夾心法是將特異性抗體結合到固相載體上形成固相抗體(捕獲抗體),然后和待檢樣本中的相應抗原結合形成免疫復合物,洗滌后再加酶標記抗體(檢測抗體),與免疫復合物中抗原結合形成酶標抗體—抗原—固相抗體復合物,加底物顯色,判斷抗原含量。整個過程中,待檢抗原經過捕獲抗體和檢測抗體雙重篩選,具有高特異性。
Elisa夾心法的優點是特異性高、靈敏度高,但其主要缺點是捕獲抗體和檢測抗體之間存在相互作用。
Elisa競爭法
ELISA競爭法預先將抗原包被在固相載體上,并加入酶標記的特異性抗體,實驗時,加入待檢抗原(或抗體),如果待檢物是抗原,則待檢抗原于預先包被在固相載體上的抗原競爭結合酶標抗體,如果待檢測物是抗體,則待檢抗體就與系統中原有的酶標抗體競爭結合包被在固相載體上的抗原,通過洗滌洗掉被競爭結合的酶標抗體,最后加底物顯色,需要注意的是顯色結果與待檢抗原(或抗體)的量成反比。
Elisa競爭法的優點是適合檢測小抗原,適合檢測復雜樣品,特異性高,靈敏度高。但是,它有一些缺點,例如每次ELISA都需要標記抗體,這可能導致抗體失活,隨著靶抗原的增加信號會降低。
Elisa實驗選擇夾心法還是競爭法?
1.根據待測物質的大?。喝舸郎y物質為大分子抗原,如蛋白質、多糖等,建議選擇夾心法;若待測物質為小分子抗原或抗體,則競爭法可能更為合適。
2.根據實驗需求:若需要高靈敏度的檢測,夾心法通常是更好的選擇;若需要進行定量或半定量檢測,競爭法則可能更適合。
3.考慮實驗操作的復雜性:夾心法相對復雜,需要兩種特異性抗體;而競爭法則相對簡單,但可能需要在實驗設計和數據分析上投入更多精力。
上述通蔚生物為大家介紹這兩種ELISA類型的區別,作為實驗室較為常用的酶聯技術,它們有各自特點。具體使用方法結合實驗需求及檢測物質大小來確定。如果您還有關于這兩種類型ELISA其它問題,歡迎前來咨詢。