酶聯(lián)免疫試劑盒，全稱(chēng)為酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）試劑盒，是一種靈敏、特異的生物分析技術(shù)，用于檢測(cè)抗原或抗體的生物試劑。在科研實(shí)驗(yàn)中，ELISA試劑盒起著比較關(guān)鍵作用，它可以幫我深入研究各種生物學(xué)現(xiàn)象，推動(dòng)科研進(jìn)步！

  在ELISA實(shí)驗(yàn)中或者選擇購(gòu)買(mǎi)ELISA試劑盒，了解ELISA試劑盒組成部分及作用比較重要！接下來(lái)上海通蔚生物詳細(xì)為大家介紹一下ELISA試劑盒組成部分及作用，幫助您更好了解這些部分在ELISA實(shí)驗(yàn)的作用及在今后選擇合適的ELISA試劑盒。

  酶聯(lián)免疫試劑盒組成

  在了解ELISA試劑盒組成之前，我們先了解下ELISA實(shí)驗(yàn)原理。在ELISA實(shí)驗(yàn)中，抗原或抗體被固定在固相載體（如微孔板）上。其次，加入待檢測(cè)樣本，其中的抗原或抗體會(huì)與固定在載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。接著，實(shí)驗(yàn)中會(huì)引入酶標(biāo)記的二抗。這些二抗能夠識(shí)別并結(jié)合已經(jīng)與待檢測(cè)分子結(jié)合的抗體，形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物。最后，加入底物后，酶標(biāo)二抗中的酶會(huì)催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可見(jiàn)的顏色變化。

圖1 通蔚ELISA試劑盒

  知道原理，我們就詳細(xì)了解下ELISA試劑盒組成，因?yàn)樵戆藢?shí)驗(yàn)用到試劑盒部分，ELISA試劑盒包含如下：

  酶標(biāo)板（微孔板）

  酶標(biāo)板是由多孔組成（96孔），每個(gè)孔都有一個(gè)潛在窗口，可以透視您的樣本。酶標(biāo)板，材質(zhì)一般為聚苯乙烯，在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中，抗原、抗體和其它生物分子通過(guò)多種機(jī)制吸附至酶標(biāo)板表面，然后與受檢樣本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟進(jìn)行反應(yīng)，通過(guò)酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。

圖2 96孔酶標(biāo)板

  抗原和抗體

  抗原和抗體是ELISA試劑盒關(guān)鍵生物分子，抗原和抗體在酶標(biāo)板特異性結(jié)合反應(yīng)解決生物學(xué)科研難題。

  酶標(biāo)記抗體

  酶標(biāo)記抗體是鏈接特異性抗原識(shí)別和信號(hào)放大橋梁。它能夠識(shí)別并結(jié)合樣品中目標(biāo)抗原上的特定抗原表位，并偶聯(lián)一種酶（例如辣根過(guò)氧化物酶 HRP 或堿性磷酸酶 AP），加入底物，酶會(huì)催化底物發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。

  緩沖液

  為了提高實(shí)驗(yàn)的可靠性，減少背景干擾。緩沖液有包被緩沖液、封閉緩沖液、樣品稀釋緩沖液、洗滌緩沖液和終止緩沖液。不同的緩沖液其作用也不同，大家可以參考自己購(gòu)買(mǎi)試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。

  底物

  底物是實(shí)驗(yàn)最后階段，它和沒(méi)標(biāo)記抗體反應(yīng)時(shí)，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將在酶標(biāo)板上顯出色彩和熒光劑。

圖3 底物顯色

  終止液

  加入底物發(fā)揮作用之后，您需要一個(gè)方法停止反應(yīng)，防止信號(hào)增強(qiáng)可能會(huì)同時(shí)放大背景信號(hào)，降低信噪比，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。終止液可以結(jié)束實(shí)驗(yàn)。

  陽(yáng)性和陰性對(duì)照樣品

  為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，ELISA試劑盒還為您提供了已知濃度的陽(yáng)性和陰性對(duì)照樣品，以幫助您得出實(shí)驗(yàn)并驗(yàn)證結(jié)果。

  說(shuō)明書(shū)

  ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)可以為您實(shí)驗(yàn)操作和注意事項(xiàng)進(jìn)行指導(dǎo)，確保您實(shí)驗(yàn)的完整性和準(zhǔn)確性。

  一個(gè)完整的ELISA試劑盒基本上包含上述的組成，大家拿到試劑盒可以了解這些組成部分。不過(guò)大家在選擇試劑盒時(shí)候要注意以下事項(xiàng)：

  首先，仔細(xì)閱讀試劑盒的說(shuō)明書(shū)是至關(guān)重要的。了解試劑盒的選用方法、組成、方法性能指標(biāo)等信息有助于選擇最適合實(shí)驗(yàn)需求的試劑盒。對(duì)于科研工作，應(yīng)選擇參考方法試劑盒；而在醫(yī)療預(yù)防工作中，建議選擇推薦的常規(guī)方法試劑盒或公認(rèn)的測(cè)定方法試劑盒。

  其次，注意檢查試劑盒是否有衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)。對(duì)于已列入衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)體外診斷試劑審批管理范圍的試劑盒，沒(méi)有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)的，不應(yīng)使用。同時(shí)，考察生產(chǎn)廠家的信譽(yù)也是必要的，以確保試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

  最后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)規(guī)模和預(yù)算合理選擇試劑盒也是關(guān)鍵。不同品牌和類(lèi)型的試劑盒價(jià)格可能存在差異，因此需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇。對(duì)于實(shí)驗(yàn)規(guī)模較大的情況，可以選擇通用的試劑盒以降低成本；而對(duì)于實(shí)驗(yàn)規(guī)模較小的情況，可以選擇專(zhuān)用的試劑盒以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和特異性。

  了解酶聯(lián)免疫試劑盒組成及作用，作為科研的小伙伴們讓我們充分利用ELISA為科學(xué)進(jìn)步和人類(lèi)發(fā)展造福！對(duì)于ELISA試劑盒還有疑問(wèn)，可以尋求通蔚ELISA在線顧問(wèn)咨詢(xún)。通蔚有不同物種的ELISA試劑盒滿(mǎn)足科研需求，高靈敏度和特異性，活動(dòng)優(yōu)惠多多，歡迎前來(lái)選購(gòu)！