上海通蔚生物自主研發ELISA試劑盒,現已涵蓋20多個種屬,數千種產品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領域,上海通蔚生物為大家總結ELISA試劑盒實驗時至關重要的步驟有:
1 . 重要的洗滌:
不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的實驗結果,如果未結合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音,有必要的話,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數。
2 . 關鍵的封閉
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位,這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會,如果背景過高,懷疑封閉不充分,那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。
目前主要有兩種類型的封閉液:
蛋白和非離子型去污劑,使用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑,好的封閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。
3 . 抗體濃度須優化
如果試劑稍有不同,則可能需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加背景,為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。
4 . 檢測試劑要適量
切勿使用過多的檢測試劑,如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。只有確保每一步操作都做到位,才會呈現完美的實驗結果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,不可以掉以輕心。
5.上海通蔚生物優勢
上海通蔚實業有限公司擁有自己的實驗室,備有專業的技術研發團隊,長期致力于各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒等科研產品的研發與銷售,ELISA實驗提供免費代測服務,并提供精湛的技術服務,更多實驗資訊可咨詢我司業務員,如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢,為您提供專業的一對一技術指導。