什么是胎牛血清？（Fetal Bovine Serum, FBS）是一種取自牛胚胎的血清，常用于配置動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基，是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，它能提供必要的生長(zhǎng)激素、脂質(zhì)和其他養(yǎng)分以供細(xì)胞生長(zhǎng)。胎牛血清來(lái)自母牛在懷孕5-8月胎牛，采用心臟穿刺采血，取得的血液通過(guò)離心等方法，經(jīng)加工后就成了胎牛血清。

  胎牛血清生產(chǎn)工藝

  一個(gè)合格的胎牛血清往往來(lái)自良好的生產(chǎn)工藝。那么，胎牛血清生產(chǎn)工藝流程有哪些呢？

圖1（胎牛血清生產(chǎn)流程）

  胎牛血清主要步驟如下：

  胎牛血清的收集。采集的胎牛血清是在經(jīng)過(guò)政府批準(zhǔn)設(shè)施中采集，在獸醫(yī)監(jiān)督下對(duì)健康的母牛進(jìn)行臨床檢查，然后用最嚴(yán)格的無(wú)菌采集技術(shù)。在采集過(guò)程，通過(guò)心臟穿刺從封閉系統(tǒng)中的過(guò)期胎兒中抽取血液，取得的血液通過(guò)離心等方法，經(jīng)加工后就成了胎牛血清。

  冷凍離心。采集的血液無(wú)菌包裝保存，冷藏，促進(jìn)凝固，獲得高純度血清。然后可以通過(guò)在冰箱中離心分離透明的黃色血清。這會(huì)從凝固的血液中去除細(xì)胞成分和凝血因子。

  過(guò)濾除菌。血清通過(guò)過(guò)濾鏈過(guò)濾用于細(xì)胞培養(yǎng)（通常為0.1μm三重過(guò)濾）。消除潛在細(xì)菌污染的類似過(guò)程是必要的，但不能完全消除病毒。如果需要，可以通過(guò)輻射（伽馬射線）進(jìn)一步對(duì)血清進(jìn)行滅菌。

  分裝貼標(biāo)保存。接下來(lái)進(jìn)行無(wú)菌包裝和貼標(biāo)，并將樣品冷凍直至實(shí)驗(yàn)室使用。該過(guò)程減少了有助于細(xì)胞生長(zhǎng)的生物活性成分的降解，并可能顯著影響胎牛血清的最終質(zhì)量。

  胎牛血清的主要成分

  血清是血液凝固后的液體部分，不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等，可用于各種常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清的主要成分是血清白蛋白，除此之外，胎牛血清含有細(xì)胞生長(zhǎng)因子，胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì)，如氨基酸、糖類、脂類及激素類物質(zhì)。

圖2（胎牛血清）

  胎牛血清主要功能

  FBS成分與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、成熟和分化之間的相互作用仍在研究中。在貼壁細(xì)胞中，例如用于培養(yǎng)肉生產(chǎn)的牛肌肉來(lái)源的衛(wèi)星細(xì)胞，細(xì)胞與培養(yǎng)皿的安全附著是早期細(xì)胞生長(zhǎng)的重要因素。

  影響細(xì)胞粘附的FBS因子包括血清擴(kuò)散因子，包括纖連蛋白和層粘連蛋白。白蛋白是血清中存在的非粘附蛋白之一，可激活粘附和擴(kuò)散因子，并影響細(xì)胞粘附的程度，并且取決于非粘附蛋白的量。

  此外，胎牛血清在牲畜生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的免疫球蛋白含量極低，生長(zhǎng)因子含量高；因此，它可用于各種物種的細(xì)胞培養(yǎng)，因?yàn)榭贵w引起的免疫反應(yīng)被最小化。盡管其影響因生長(zhǎng)的細(xì)胞類型而異，但血清中存在的生長(zhǎng)因子在細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖中發(fā)揮著重要作用。此外，雖然在不添加單獨(dú)的生長(zhǎng)因子的情況下將生長(zhǎng)因子單獨(dú)添加到血清中的效果是明顯的，但是根據(jù)生長(zhǎng)因子的類型和含量，效果可能不均勻。有效誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)的胎牛血清因子包括生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子。這些因素有時(shí)會(huì)影響分化，例如表皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）和血小板源性生長(zhǎng)因子。這種效應(yīng)可以縮短細(xì)胞培養(yǎng)周期，降低親代生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)分析的成本。

  血清中酶和激素的組成根據(jù)動(dòng)物的屠宰期而變化。這些血清混合物成分含有細(xì)胞增殖和維持所需的大部分因子；因此，建議根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的目的適量使用。尚未成功地對(duì)每種成分的效果進(jìn)行明確的研究。與成年動(dòng)物全血的成分類似，血清中的多種營(yíng)養(yǎng)素可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。糖類或氨基酸可以支持細(xì)胞增殖和代謝所需的能量。胎牛血清中含有微量的維生素和礦物質(zhì)，甚至這些量也會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。已經(jīng)進(jìn)行了許多研究來(lái)確定維生素或礦物質(zhì)對(duì)各種類型細(xì)胞的粘附、增殖或分化的積極/消極影響。

  此外，激素因子和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（攜帶激素、礦物質(zhì)、微量元素和脂質(zhì)）是維持細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中pH變化的必要成分，它們也會(huì)影響蛋白酶抑制。這些效應(yīng)對(duì)于維持細(xì)胞活力非常重要。

  胎牛血清使用要點(diǎn)

  合理正確的使用胎牛血清可以使胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮理想效果。在使用胎牛血清一些要點(diǎn)要留意，主要是存儲(chǔ)和解凍。

  胎牛血清的存儲(chǔ)。胎牛血清需在-20度長(zhǎng)期避光保存，因?yàn)榈蜏乜梢杂行У匮泳徰逯猩锘钚晕镔|(zhì)的降解和變性。注意：如果在4度保存，不應(yīng)超過(guò)一個(gè)月。在使用血清時(shí)候，避免反復(fù)凍融，注意分裝使用。

  正確解凍。胎牛血清解凍非常關(guān)鍵，可先在4度冰箱過(guò)夜解凍，這里推薦使用血清融化三步法：即將500ml血清在室溫下放置1.5h，20℃水浴25min，37℃ 水浴35min。

  好了，上述上海通蔚為大家介紹胎牛血清，從生產(chǎn)工藝到胎牛血清的成分及存儲(chǔ)。市面上出現(xiàn)各類的牛血清，比如胎牛、新生牛和小牛，其實(shí)三者區(qū)別不大，主要區(qū)分是根據(jù)年齡不同來(lái)命名。胎牛血清因胎牛在母體內(nèi)未接觸外界，免疫球蛋白含量應(yīng)該是極少的，血清比較純，培養(yǎng)細(xì)胞的效果較佳，其次是新生牛和小牛。具體根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。