作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,DMEM培養(yǎng)基是Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基。在細(xì)胞培養(yǎng)中,或許會接觸到DMEM高糖和DMEM/F12培養(yǎng)基。那么,他們之間有什么區(qū)別呢?了解它們之間差異,有助于提高細(xì)胞培養(yǎng)的成果。
認(rèn)識DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基
DMEM高糖
DMEM高糖培養(yǎng)基是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它是從原始的伊格爾基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)改良而來,并在其基礎(chǔ)上增加了氨基酸和維生素的濃度,并提高了葡萄糖濃度。DMEM高糖培養(yǎng)基的原始配方含有1000mg/L葡萄糖,主要用于培養(yǎng)小鼠胚胎細(xì)胞。隨著研究的深入,DMEM培養(yǎng)基經(jīng)過多次改良,現(xiàn)在廣泛用于培養(yǎng)各種哺乳動物細(xì)胞,包括小鼠、雞和人類細(xì)胞。
DMEM高糖培養(yǎng)基的主要特點是:
1.高葡萄糖濃度:DMEM高糖培養(yǎng)基的葡萄糖濃度為4500mg/L,相比標(biāo)準(zhǔn)DMEM的1000mg/L增加了4.5倍,為快速增殖的細(xì)胞提供充足的能量來源。
2.高濃度的氨基酸和維生素:DMEM高糖培養(yǎng)基中包含比標(biāo)準(zhǔn)DMEM更高的濃度氨基酸和維生素,例如谷氨酰胺濃度為2920mg/L,丙酮酸鈉濃度為110mg/L,以及其他必需的氨基酸和維生素,滿足細(xì)胞生長的需要。
3.廣泛適用性:DMEM高糖培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于培養(yǎng)多種類型的細(xì)胞,包括:
快速增殖的細(xì)胞:例如腫瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、CHO細(xì)胞等。
懸浮細(xì)胞:例如某些白血病細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞等。
原代細(xì)胞:例如從組織中分離的細(xì)胞。
轉(zhuǎn)化細(xì)胞:例如經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。
DMEM高糖培養(yǎng)基的典型應(yīng)用場景包括:
雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng):用于生產(chǎn)抗體和治療性蛋白。例如,使用DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠雜交瘤細(xì)胞,生產(chǎn)針對特定抗原的單克隆抗體。
CHO細(xì)胞培養(yǎng):用于生產(chǎn)重組蛋白和生物制劑。例如,利用CHO細(xì)胞表達(dá)重組人促紅細(xì)胞生成素(EPO),用于治療貧血。
疫苗生產(chǎn):用于生產(chǎn)病毒和細(xì)菌疫苗。例如,利用CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗。
細(xì)胞治療研究:用于培養(yǎng)用于細(xì)胞治療的細(xì)胞,例如CAR-T細(xì)胞。
DMEM高糖培養(yǎng)基的優(yōu)勢在于其成分豐富、價格實惠,能夠滿足多種細(xì)胞類型的培養(yǎng)需求。然而,需要注意的是,對于一些對高濃度葡萄糖敏感的細(xì)胞類型,例如神經(jīng)細(xì)胞、原代細(xì)胞,建議使用低糖DMEM或其他適合的培養(yǎng)基
DMEM/F12
DMEM/F12是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于促進(jìn)多種哺乳動物細(xì)胞的生長,包括MDCK細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞和大鼠成纖維細(xì)胞等。
DMEM/F12培養(yǎng)基是由DMEM培養(yǎng)基和Ham'sF-12培養(yǎng)基以1:1的比例混合而成,并對一些成分進(jìn)行了優(yōu)化。該配方結(jié)合了DMEM培養(yǎng)基中高濃度的葡萄糖、氨基酸和維生素,以及Ham'sF-12培養(yǎng)基中更全面的營養(yǎng)成分和生長因子,例如:
1.高濃度葡萄糖:提供細(xì)胞生長所需的能量來源。
2.必需氨基酸和維生素:滿足細(xì)胞合成蛋白質(zhì)和進(jìn)行代謝活動的需要。
3.其他關(guān)鍵成分:包括鋅、腐胺、次黃嘌呤、胸苷等,促進(jìn)細(xì)胞生長和分化。
4.除了DMEM和Ham'sF-12中的成分外,DMEM/F12培養(yǎng)基中通常還會添加一些常見的補(bǔ)充劑,例如:
5.L-谷氨酰胺:細(xì)胞生長不可或缺的營養(yǎng)物質(zhì)。
6.酚紅指示劑:用于指示培養(yǎng)基的pH值。
由于DMEM/F12培養(yǎng)基本身缺乏蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和生長因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)來補(bǔ)充這些成分,為細(xì)胞提供更完整的生長環(huán)境。此外,DMEM/F12培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需要在5-10%的CO2環(huán)境中培養(yǎng),以維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定,并模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境。
DMEM/F12培養(yǎng)基的優(yōu)勢在于:
1.營養(yǎng)豐富:提供了細(xì)胞生長所需的多種營養(yǎng)成分。
2.廣泛適用性:可以用于培養(yǎng)多種類型的哺乳動物細(xì)胞。
3.可控性:可以通過添加不同的補(bǔ)充劑,來滿足不同細(xì)胞類型的培養(yǎng)需求。
4.DMEM/F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)和細(xì)胞治療等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。例如,它被用于:
5.藥物篩選:用于測試藥物對細(xì)胞的毒性和有效性。
6.細(xì)胞模型構(gòu)建:用于建立模擬人體組織和器官的細(xì)胞模型。
7.細(xì)胞治療研究:用于培養(yǎng)用于細(xì)胞治療的細(xì)胞。
DMEM/F12培養(yǎng)基是一種功能強(qiáng)大且用途廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)基,它通過結(jié)合DMEM和Ham'sF-12培養(yǎng)基的優(yōu)點,為各種哺乳動物細(xì)胞提供了理想的生長環(huán)境,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。下表是
DMEM高糖培養(yǎng)基和DMEM/F12培養(yǎng)基區(qū)別:
特性
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DMEM高糖培養(yǎng)基
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DMEM/F12培養(yǎng)基
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葡萄糖濃度
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高(通常為4.5 g/L)
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中等(通常為1.0 g/L)
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成分來源
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基于Eagle的最小必需培養(yǎng)基(MEM)修改
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DMEM和Ham's F-12的1:1混合
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氨基酸
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含有較多的氨基酸
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含有更全面和豐富的氨基酸和其他營養(yǎng)成分
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維生素
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含有基本的維生素
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含有更廣泛的維生素
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礦物質(zhì)
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含有基本的礦物質(zhì)
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含有多種礦物質(zhì)
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緩沖系統(tǒng)
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常使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng)
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包含HEPES和碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng)
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使用細(xì)胞類型
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常用于快速生長的細(xì)胞(如HeLa, 293T)
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常用于慢速生長的細(xì)胞和更敏感的細(xì)胞(如原代細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞)
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應(yīng)用
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廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng)和常規(guī)細(xì)胞系的生長
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用于需要更復(fù)雜營養(yǎng)需求的細(xì)胞培養(yǎng),如神經(jīng)元和肝細(xì)胞培養(yǎng)
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其他添加物
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通常不含生長因子和激素
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通常不含生長因子和激素
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DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基選擇
選擇DMEM/F12還是DMEM高糖培養(yǎng)基,需要根據(jù)您的具體實驗需求和細(xì)胞類型來決定。以下是一些關(guān)鍵考慮因素:
1.細(xì)胞類型:
快速增殖的細(xì)胞:DMEM高糖培養(yǎng)基更適合快速增殖的細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、CHO細(xì)胞等。其高濃度的葡萄糖能夠為這些細(xì)胞提供充足的能量,促進(jìn)它們的快速生長。
對葡萄糖濃度敏感的細(xì)胞:DMEM/F12培養(yǎng)基更適合對葡萄糖濃度敏感的細(xì)胞類型,例如神經(jīng)細(xì)胞、原代細(xì)胞等。高濃度的葡萄糖可能會對這些細(xì)胞的生長和分化產(chǎn)生負(fù)面影響。
其他細(xì)胞類型:對于一些特定類型的細(xì)胞,例如上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等,可能需要根據(jù)具體情況選擇合適的培養(yǎng)基。
2.實驗?zāi)康模?br />
長期培養(yǎng):DMEM/F12培養(yǎng)基更適合長期培養(yǎng),因為其低葡萄糖濃度可以減緩細(xì)胞的增殖速度,并維持細(xì)胞的穩(wěn)定性。
細(xì)胞分化:DMEM/F12培養(yǎng)基更適合進(jìn)行細(xì)胞分化實驗,因為其低葡萄糖濃度可以更好地模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境。
快速增殖:DMEM高糖培養(yǎng)基更適合需要快速增殖細(xì)胞的實驗,例如腫瘤細(xì)胞增殖研究、抗體生產(chǎn)等。
3.培養(yǎng)條件:
CO2濃度:DMEM/F12培養(yǎng)基和DMEM高糖培養(yǎng)基都通常需要在5-10%的CO2環(huán)境中培養(yǎng)。
4.成本:
DMEM高糖:通常比DMEM/F12更便宜。
如果需要培養(yǎng)快速增殖的細(xì)胞,DMEM高糖培養(yǎng)基通常是更合適的選擇。如果需要培養(yǎng)對葡萄糖濃度敏感的細(xì)胞,或進(jìn)行長期培養(yǎng)、細(xì)胞分化等實驗,DMEM/F12培養(yǎng)基更合適。
上述為大家介紹了DMEM/F12和DMEM高糖培養(yǎng)基區(qū)別,在細(xì)胞培養(yǎng)中選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)基非常重要,希望上述內(nèi)容對你有所幫助,可以提高您細(xì)胞培養(yǎng)的效率和成功。上海通蔚,品質(zhì)保證!DMEM/F12營養(yǎng)豐富,適合多種哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合長期培養(yǎng)和細(xì)胞分化實驗。DMEM高糖,專為快速增殖細(xì)胞而設(shè)計,為您的科研提供更多選擇!我們價格實惠,歡迎來選購!