作為基礎培養基,DMEM培養基是Dulbecco改良的Eagle培養基。在細胞培養中,或許會接觸到DMEM高糖和DMEM/F12培養基。那么,他們之間有什么區別呢?了解它們之間差異,有助于提高細胞培養的成果。
認識DMEM/F12和DMEM高糖培養基
DMEM高糖
DMEM高糖培養基是一種廣泛應用于細胞培養的培養基,它是從原始的伊格爾基礎培養基(BME)改良而來,并在其基礎上增加了氨基酸和維生素的濃度,并提高了葡萄糖濃度。DMEM高糖培養基的原始配方含有1000mg/L葡萄糖,主要用于培養小鼠胚胎細胞。隨著研究的深入,DMEM培養基經過多次改良,現在廣泛用于培養各種哺乳動物細胞,包括小鼠、雞和人類細胞。
DMEM高糖培養基的主要特點是:
1.高葡萄糖濃度:DMEM高糖培養基的葡萄糖濃度為4500mg/L,相比標準DMEM的1000mg/L增加了4.5倍,為快速增殖的細胞提供充足的能量來源。
2.高濃度的氨基酸和維生素:DMEM高糖培養基中包含比標準DMEM更高的濃度氨基酸和維生素,例如谷氨酰胺濃度為2920mg/L,丙酮酸鈉濃度為110mg/L,以及其他必需的氨基酸和維生素,滿足細胞生長的需要。
3.廣泛適用性:DMEM高糖培養基廣泛應用于培養多種類型的細胞,包括:
快速增殖的細胞:例如腫瘤細胞、雜交瘤細胞、CHO細胞等。
懸浮細胞:例如某些白血病細胞、雜交瘤細胞等。
原代細胞:例如從組織中分離的細胞。
轉化細胞:例如經過基因轉染的細胞。
DMEM高糖培養基的典型應用場景包括:
雜交瘤細胞培養:用于生產抗體和治療性蛋白。例如,使用DMEM高糖培養基培養小鼠雜交瘤細胞,生產針對特定抗原的單克隆抗體。
CHO細胞培養:用于生產重組蛋白和生物制劑。例如,利用CHO細胞表達重組人促紅細胞生成素(EPO),用于治療貧血。
疫苗生產:用于生產病毒和細菌疫苗。例如,利用CHO細胞生產乙肝疫苗。
細胞治療研究:用于培養用于細胞治療的細胞,例如CAR-T細胞。
DMEM高糖培養基的優勢在于其成分豐富、價格實惠,能夠滿足多種細胞類型的培養需求。然而,需要注意的是,對于一些對高濃度葡萄糖敏感的細胞類型,例如神經細胞、原代細胞,建議使用低糖DMEM或其他適合的培養基
DMEM/F12
DMEM/F12是一種廣泛應用于細胞培養的基礎培養基,用于促進多種哺乳動物細胞的生長,包括MDCK細胞、神經膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞和大鼠成纖維細胞等。
DMEM/F12培養基是由DMEM培養基和Ham'sF-12培養基以1:1的比例混合而成,并對一些成分進行了優化。該配方結合了DMEM培養基中高濃度的葡萄糖、氨基酸和維生素,以及Ham'sF-12培養基中更全面的營養成分和生長因子,例如:
1.高濃度葡萄糖:提供細胞生長所需的能量來源。
2.必需氨基酸和維生素:滿足細胞合成蛋白質和進行代謝活動的需要。
3.其他關鍵成分:包括鋅、腐胺、次黃嘌呤、胸苷等,促進細胞生長和分化。
4.除了DMEM和Ham'sF-12中的成分外,DMEM/F12培養基中通常還會添加一些常見的補充劑,例如:
5.L-谷氨酰胺:細胞生長不可或缺的營養物質。
6.酚紅指示劑:用于指示培養基的pH值。
由于DMEM/F12培養基本身缺乏蛋白質、脂質和生長因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)來補充這些成分,為細胞提供更完整的生長環境。此外,DMEM/F12培養基使用碳酸氫鈉緩沖系統,需要在5-10%的CO2環境中培養,以維持培養基的pH值穩定,并模擬細胞在體內的生長環境。
DMEM/F12培養基的優勢在于:
1.營養豐富:提供了細胞生長所需的多種營養成分。
2.廣泛適用性:可以用于培養多種類型的哺乳動物細胞。
3.可控性:可以通過添加不同的補充劑,來滿足不同細胞類型的培養需求。
4.DMEM/F12培養基在生物醫學研究、藥物研發和細胞治療等領域有著廣泛的應用。例如,它被用于:
5.藥物篩選:用于測試藥物對細胞的毒性和有效性。
6.細胞模型構建:用于建立模擬人體組織和器官的細胞模型。
7.細胞治療研究:用于培養用于細胞治療的細胞。
DMEM/F12培養基是一種功能強大且用途廣泛的細胞培養基,它通過結合DMEM和Ham'sF-12培養基的優點,為各種哺乳動物細胞提供了理想的生長環境,在生物醫學領域發揮著重要的作用。下表是
DMEM高糖培養基和DMEM/F12培養基區別:
特性
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DMEM高糖培養基
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DMEM/F12培養基
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葡萄糖濃度
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高(通常為4.5 g/L)
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中等(通常為1.0 g/L)
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成分來源
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基于Eagle的最小必需培養基(MEM)修改
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DMEM和Ham's F-12的1:1混合
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氨基酸
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含有較多的氨基酸
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含有更全面和豐富的氨基酸和其他營養成分
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維生素
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含有基本的維生素
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含有更廣泛的維生素
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礦物質
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含有基本的礦物質
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含有多種礦物質
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緩沖系統
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常使用碳酸氫鈉作為緩沖系統
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包含HEPES和碳酸氫鈉作為緩沖系統
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使用細胞類型
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常用于快速生長的細胞(如HeLa, 293T)
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常用于慢速生長的細胞和更敏感的細胞(如原代細胞和神經細胞)
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應用
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廣泛用于各種細胞培養和常規細胞系的生長
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用于需要更復雜營養需求的細胞培養,如神經元和肝細胞培養
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其他添加物
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通常不含生長因子和激素
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通常不含生長因子和激素
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DMEM/F12和DMEM高糖培養基選擇
選擇DMEM/F12還是DMEM高糖培養基,需要根據您的具體實驗需求和細胞類型來決定。以下是一些關鍵考慮因素:
1.細胞類型:
快速增殖的細胞:DMEM高糖培養基更適合快速增殖的細胞,例如腫瘤細胞、雜交瘤細胞、CHO細胞等。其高濃度的葡萄糖能夠為這些細胞提供充足的能量,促進它們的快速生長。
對葡萄糖濃度敏感的細胞:DMEM/F12培養基更適合對葡萄糖濃度敏感的細胞類型,例如神經細胞、原代細胞等。高濃度的葡萄糖可能會對這些細胞的生長和分化產生負面影響。
其他細胞類型:對于一些特定類型的細胞,例如上皮細胞、內皮細胞等,可能需要根據具體情況選擇合適的培養基。
2.實驗目的:
長期培養:DMEM/F12培養基更適合長期培養,因為其低葡萄糖濃度可以減緩細胞的增殖速度,并維持細胞的穩定性。
細胞分化:DMEM/F12培養基更適合進行細胞分化實驗,因為其低葡萄糖濃度可以更好地模擬細胞在體內的生長環境。
快速增殖:DMEM高糖培養基更適合需要快速增殖細胞的實驗,例如腫瘤細胞增殖研究、抗體生產等。
3.培養條件:
CO2濃度:DMEM/F12培養基和DMEM高糖培養基都通常需要在5-10%的CO2環境中培養。
4.成本:
DMEM高糖:通常比DMEM/F12更便宜。
如果需要培養快速增殖的細胞,DMEM高糖培養基通常是更合適的選擇。如果需要培養對葡萄糖濃度敏感的細胞,或進行長期培養、細胞分化等實驗,DMEM/F12培養基更合適。
上述為大家介紹了DMEM/F12和DMEM高糖培養基區別,在細胞培養中選擇合適的細胞培養基非常重要,希望上述內容對你有所幫助,可以提高您細胞培養的效率和成功。上海通蔚,品質保證!DMEM/F12營養豐富,適合多種哺乳動物細胞培養,尤其適合長期培養和細胞分化實驗。DMEM高糖,專為快速增殖細胞而設計,為您的科研提供更多選擇!我們價格實惠,歡迎來選購!