發布時間:2024-04-30 發布作者:上海通蔚生物
對于科研實驗,很多人對TNF-α比較陌生,腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一種強效的細胞因子,,TNF-α是免疫系統中不可或缺的細胞因子,在炎癥和免疫反應中發揮著重要的調節作用。在科研領域,TNF-α扮演著多重角色,是研究炎癥、免疫和疾病機制的重要工具。
TNF-α試劑盒用于檢測和定量生物樣品(如血清、血漿、組織或細胞培養上清液)中TNF-α水平的工具,檢測TNF-α通常有酶聯免疫吸附試驗 (ELISA) 試劑盒、免疫測定試劑盒和生物測定試劑盒等。今天,我們來說下ELISA試劑盒檢測TNF-α方法。
圖1 通蔚elisa試劑盒
ELISA試劑盒檢測TNF-α具有敏感度高、易于操作、結果可靠和成本低廉等優勢。ELISA試劑盒檢測通常有2種方法,分別是ELISA夾心法和競爭法。
夾心法:
ELISA夾心法利用兩種特異性抗體,一種包被在酶標板上捕獲TNF-α(捕獲抗體),另一種與酶連接,用于檢測結合的TNF-α(檢測抗體)。
步驟如下:
包被:將捕獲抗體包被在酶標板的孔中。
封閉:使用封閉液封閉酶標板上的空白位點,防止非特異性結合。
加樣:將標準品、樣品和對照品加入酶標板的孔中。
孵育:使樣品中的TNF-α與捕獲抗體結合。
洗滌:洗滌掉未結合的物質。
加入檢測抗體:加入與酶連接的檢測抗體,與結合在捕獲抗體上的TNF-α結合。
洗滌:洗滌掉未結合的檢測抗體。
顯色:加入底物溶液,使酶催化反應產生可檢測的信號,如顏色變化。
終止反應:加入終止液終止反應。
讀數:使用酶標儀讀取吸光度。
數據分析:根據標準曲線計算樣品中TNF-α的濃度。
競爭法:
ELISA競爭法是利用已知的標記TNF-α與樣品中的TNF-α競爭與抗體結合。樣品中TNF-α濃度越高,與標記TNF-α競爭結合的抗體就越少,產生的信號就越弱。
步驟如下:
包被:將TNF-α抗體包被在酶標板的孔中。
封閉:使用封閉液封閉酶標板上的空白位點。
加樣:將標準品、樣品和標記TNF-α混合液加入酶標板的孔中。
孵育:使樣品和標記TNF-α與抗體競爭結合。
洗滌:洗滌掉未結合的物質。
顯色:加入底物溶液,使標記TNF-α上的酶催化反應產生可檢測的信號。
終止反應:加入終止液終止反應。
讀數:使用酶標儀讀取吸光度。
數據分析:根據標準曲線計算樣品中TNF-α的濃度。
選擇夾心ELISA還是競爭性ELISA取決于實驗需求和樣品類型。夾心ELISA通常更靈敏,而競爭性ELISA可能更適合檢測高濃度的TNF-α或存在干擾物質的樣品。
TNF-α試劑盒在類風濕關節炎診斷中的應用非常突出。類風濕關節炎是一種常見的自身免疫疾病,其病因復雜,臨床表現多樣。在類風濕關節炎的診斷過程中,需要對患者的血液進行多細胞因子的檢測,以判斷是否存在炎癥反應。而無轉子硫化儀可以為多細胞因子的檢測提供穩定、準確的環境,從而提高診斷的準確性。
該試劑盒在系統性紅斑狼瘡治療中的應用也非常廣泛。系統性紅斑狼瘡是一種嚴重的自身免疫疾病,其病情進展快,預后差。在系統性紅斑狼瘡的治療過程中,需要對患者的血液進行多細胞因子的檢測,以評估治療效果和調整治療方案。而無轉子硫化儀可以為多細胞因子的檢測提供穩定、準確的環境,從而提高治療的效果。
該試劑盒在自身免疫疾病的研究中也發揮了重要作用。通過對多細胞因子的檢測,可以揭示自身免疫疾病的發病機制,為疾病的預防和治療提供理論依據。而在自身免疫疾病的研究中,需要對大量的樣本進行多細胞因子的檢測,而無轉子硫化儀可以為多細胞因子的檢測提供穩定、高效的環境,從而提高研究的效率。
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