發(fā)布時(shí)間:2022-01-15 發(fā)布作者:上海通蔚生物
ELISA法類型:
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體,重復(fù)兩次,洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。
間接法常用于檢測(cè)抗體,將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原,重復(fù)兩次。洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測(cè)定塑膠盤中的吸光值,以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;加入待測(cè)檢體、帶有酶的抗原,與塑膠孔盤上的抗體專一性鍵結(jié)。塑膠孔盤上固著抗體數(shù)量有限,檢體中抗原量越多,帶有酶的抗原可鍵結(jié)固著抗體就越少。
elisa實(shí)驗(yàn)原理:
在測(cè)定時(shí)把受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體,按不同步驟與固相載體表面抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌方法使固相載體上的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。
加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無定性或定量分析。