發布時間:2023-12-13 發布作者:上海通蔚生物
上海通蔚生物豬主動脈內皮細胞詳細介紹如下:
豬主動脈內皮細胞分離自主動脈組織。主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈。在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈。
髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈內皮細胞是覆蓋在主動脈內面的單層細胞,可分泌一系列血管活性物質而保持血管穩態,當其受到炎癥或其它因素刺激后穩態被破壞而導致一些心血管疾病的發生。
因此,主動脈內皮細胞已成為研究心血管疾病發病機制及治療藥物不可缺少的工具。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁,是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮) 的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統,由心臟直至最小的微血管。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的豬主動脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
豬主動脈內皮細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
使用方法
豬主動脈內皮細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈內皮細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代豬主動脈內皮細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
上海通蔚生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業單位提供的科研試劑和完善的技術服務,滿足生物化學、分子生物學、細胞生物學、免疫學等生物科技實驗需求。