流式細(xì)胞周期檢測(cè)本文將主要以細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)為例，介紹流式細(xì)胞術(shù)在實(shí)際中的應(yīng)用。

細(xì)胞周期檢測(cè)使用飽和量的DNA結(jié)合染料對(duì)DNA進(jìn)行染色。在大多數(shù)情況下，使用70%乙醇溶液固定細(xì)胞，使細(xì)胞通透，然后使用染料(PI, 7AAD, DAPI)染色。當(dāng)然，也可以使用破膜劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，直接對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行周期檢測(cè)（聯(lián)科生物周期檢測(cè)試劑盒就提供了破膜劑）。此外，個(gè)別染料可以進(jìn)入活細(xì)胞，在不傷害細(xì)胞的情況下染色DNA，比如Hoescht 33342。在細(xì)胞周期檢測(cè)中，以低流速線性放大的方式采集樣本，然后使用倍性建模軟件進(jìn)行分析，以確定細(xì)胞所處的階段。RNA流式細(xì)胞術(shù)將傳統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)和熒光原位雜交(FISH)結(jié)合應(yīng)用，檢測(cè)RNA表達(dá)和蛋白表達(dá)。當(dāng)無(wú)法檢測(cè)目標(biāo)蛋白表達(dá)，但可以檢測(cè)RNA表達(dá)時(shí)，這種技術(shù)就可以發(fā)揮作用。

流式細(xì)胞分選

細(xì)胞分選利用流式細(xì)胞分選儀來(lái)分離純化細(xì)胞或顆粒以供進(jìn)一步分析。基本上，任何具有熒光的細(xì)胞或顆粒都可以被分選。細(xì)胞可以被分選到96孔板、384孔板、管中和載玻片上。常見(jiàn)的樣本有表達(dá)熒光蛋白的轉(zhuǎn)染細(xì)胞、干細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和白細(xì)胞群。細(xì)胞分選需要考慮的一個(gè)主要因素，是對(duì)大量細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，增加所需的抗體量。

其他應(yīng)用絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)

絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)可用于任何免疫分型研究，該技術(shù)利用隨樣本一起采集的已知濃度的熒光珠對(duì)樣本進(jìn)行分析，并將目的細(xì)胞群的門控?cái)?shù)量與在同一樣本中獲得的熒光珠數(shù)量進(jìn)行比較，以計(jì)算生成單位體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量。
小顆粒檢測(cè)和分選使用高靈敏度的流式細(xì)胞儀，可以檢測(cè)和分選外泌體和其他亞微米顆粒。細(xì)胞外泌體、病毒和其他顆粒的分析在多個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用，包括癌癥生物學(xué)、癌癥治療和疫苗開(kāi)發(fā)。隨著不斷發(fā)展，近年來(lái)，流式細(xì)胞術(shù)也開(kāi)始在吞噬作用分析、多重微珠陣列檢測(cè)、細(xì)胞定量分析等研究中得到應(yīng)用。
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