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【通蔚生物】:豬圓環病毒3型染料法熒光定量PCR試劑盒原理介紹

發布時間:2023-11-29     發布作者:上海通蔚生物

豬圓環病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒規格實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下:

PCR試劑盒

1.TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'- 3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的*技術平臺。


2.SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地參入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。


3.分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光。


熒光定量PCR服務:

簡介:實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR試劑盒技術服務,全部實驗皆使用PCR試劑完成,主要定量PCR儀器。


1、熒光定量PCR服務要求:


(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA (大于5ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。

(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA來源等


2、熒光定量PCR操作程序


(o1)引物(探針)設計與合成。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。

(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。


上海通蔚生物科技有限公司自成立以來,一向以“優異的產品,優惠的報價和交心的服務”得到廣闊新老客戶的必定和支撐,不斷提高自身的專業技術水平和服務質量,為您提供非常好的產品。

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