通蔚生物
谷氨酸(Glu)含量測試盒測定意義測定原理
測定意義:
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
測定原理:
利用專用提取液提取,然后用顯色劑進行顯色,顯色后在570nm下進行測定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
谷鰓酸提取
1、細菌或培養(yǎng)細胞樣品:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清:按照細菌或細胞數(shù)量(10'個):試劑一體積(mL)為500~1000: 1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次):8000g常溫離心10min,取上清,置冰上待測。
2
、組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL.試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)或細胞培養(yǎng)液樣品:按照血清(漿)或細胞培養(yǎng)液體積(mL):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)或者細胞培養(yǎng)液加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min,取上清,置冰上待測。
注 意:
1、該試劑盒僅適用于發(fā)酵液或組織中谷氨酸含量測定,檢測下限為100ug/mL。
2、標(biāo)準曲線線性范圍為:100ug/mL. -600ug/mL。
3
、A線性范圍為:0.01-1:若大于1則需要將上清液用試劑一稀釋至適當(dāng)倍數(shù)后測定,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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