細(xì)胞信息
細(xì)胞名稱 |
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細(xì)胞品牌 |
通蔚生物 |
種屬來源 |
人 |
組織來源 |
胃 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
細(xì)胞簡介 |
胃是人體的消化器官,位于膈下,胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成,并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中成纖維細(xì)胞主要分布于粘膜層中的固有層、黏膜下層和外膜層。 成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中最常見的細(xì)胞,電鏡下,成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和高爾基復(fù)合體,表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。己知成纖維細(xì)胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細(xì)胞外基質(zhì),在組織器官纖維化過程中發(fā)揮重要作用。 |
細(xì)胞鑒定 |
纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等 |
細(xì)胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
培養(yǎng)基 |
人原代胃成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
細(xì)胞貨期 |
3-4周 |
發(fā)貨方式 |
復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) |
供應(yīng)范圍 |
僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨處理 |
取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) |
傳代密度 |
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) |
傳代比例 |
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 |
傳代方法
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1. 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化; 3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng); 4. 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
注意事項(xiàng)
重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。 2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 |
到貨須知 |
1. 收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 2. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 3. 由于運(yùn)輸?shù)脑颍糠旨?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 |
售后服務(wù)
細(xì)胞予重發(fā) |
1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。 |
2. 收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。 |
3. 收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。 |
4. 常溫發(fā)貨細(xì)胞靜置2小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。 |
5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。 |
6. 細(xì)胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。 |
細(xì)胞不予重發(fā) |
1. 客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。 |
2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。 |
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。 |
6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā)。 |
特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費(fèi)服務(wù)電話021-54845833或15800441009,我們隨時(shí)給予實(shí)驗(yàn)中的免費(fèi)解答。 |