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產(chǎn)品中心

  • 人紅細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW-CC10127
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨 , 一周左右
    • 商品庫存:100
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細(xì)胞信息

細(xì)胞名稱

人紅細(xì)胞

細(xì)胞品牌

通蔚生物

種屬來源

組織來源

外周血

生長特性

不可凍融,每天需輕輕顛倒,將紅細(xì)胞輕輕搖起

分離方法

通過無菌采集抗凝血,離心后獲得紅細(xì)胞沉淀,經(jīng)等量PBS洗滌 2-3次至上清透亮,最終用PBS緩沖液配置不同濃度的紅細(xì)胞

細(xì)胞簡介

紅細(xì)胞(Erythrocytes,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,是脊椎動物體內(nèi)通過血液運送氧氣的最主要的媒介,同時還存在免疫功能。紅細(xì)胞可以運輸氧氣,也可以運輸二氧化碳。運輸二氧化碳時血液呈暗紫色,運輸氧氣時則呈鮮紅色。紅細(xì)胞會生成于骨髓之內(nèi)。紅細(xì)胞老化后,易導(dǎo)致血管堵塞,所以會自動返回骨髓深處,由白細(xì)胞負(fù)責(zé)銷毀;或是在經(jīng)過肝臟時,被巨噬細(xì)胞分解,成為膽汁。哺乳動物的紅細(xì)胞呈兩面中央凹的圓餅狀,中央較薄。周緣較厚,故在血涂片標(biāo)本上中央染色較淺、周圍較深。新鮮單個紅細(xì)胞為黃綠色,大量紅細(xì)胞使血液呈深紅色。成熟的紅細(xì)胞(哺乳動物)沒有細(xì)胞核和線粒體,富含血紅蛋白。依靠葡萄糖合成能量,平均直徑為9um。

細(xì)胞鑒定

血涂片

支原體檢測

人紅細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

細(xì)胞規(guī)格

5x10?cells/T25或1mL凍存管

培養(yǎng)基

人紅細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細(xì)胞代數(shù)

1代

細(xì)胞貨期

現(xiàn)貨 1周左右

發(fā)貨方式

復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用)

供應(yīng)范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說明

具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主


細(xì)胞培養(yǎng)操作

收貨處理

取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

細(xì)胞復(fù)蘇

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

傳代密度

細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

 

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


注意事項

重要提醒

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。

到貨須知

1. 收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

3. 由于運輸?shù)脑颍糠旨?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

4. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

 

售后服務(wù)

細(xì)胞予重發(fā)

1. 細(xì)胞運輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)

2. 收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)

3. 收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)

4. 常溫發(fā)貨細(xì)胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)

5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染經(jīng)核實后,重發(fā)

6. 細(xì)胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)

細(xì)胞不予重發(fā)

1. 客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)

2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)

3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)

6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)

特別說明

上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話021-54845833或15800441009,我們隨時給予實驗中的免費解答。

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