細(xì)胞基本信息
細(xì)胞名稱 |
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貨 號 |
TW-CC3830 |
細(xì)胞品牌 |
通蔚生物 |
種屬來源 |
人 |
組織來源 |
胃 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞簡介 |
Luciferase HGC-27細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶和綠色熒光蛋白。HGC27-LUC-EGFP細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。HGC2細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。HGC-27細(xì)胞源自未分化胃癌組織,能分泌粘液素。 |
puro藥篩濃度 |
HGC27-LUC-EGFP細(xì)胞puro藥篩濃度為1. 0ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持 |
細(xì)胞規(guī)格 |
1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管 |
保藏機(jī)構(gòu) |
BCRJ; 0310 ECACC; 94042256 |
培養(yǎng)基 |
89%DMEM+10%FBS+1%PS |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞貨期 |
現(xiàn)貨,1周左右 |
發(fā)貨方式 |
復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費用) |
供應(yīng)范圍 |
僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作
T25瓶 |
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收貨處理 |
觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) |
傳代密度 |
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) |
傳代比例 |
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
傳代方法 |
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
注意事項
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1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。 |
凍存管 |
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收貨處理 |
收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 |
傳代密度 |
第二天換液并檢查細(xì)胞密度 |
傳代比例 |
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
傳代方法 |
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
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1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存。 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 |
細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞密度 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例 |
凍存方法 |
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項 |
凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案 |
售后服務(wù)
細(xì)胞予 |
1.細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。 |
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。 |
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3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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6.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
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細(xì)胞不予 |
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。 |
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
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3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
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4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。 |
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5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。 |
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6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。 |