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021-54845833/15800441009
細(xì)胞基本信息
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細(xì)胞名稱 |
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貨 號 |
TW-CC3791 |
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細(xì)胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
淋巴 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細(xì)胞形態(tài) |
淋巴母細(xì)胞樣 |
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活性檢測報告 |
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細(xì)胞簡介 |
Luciferase RAMOS細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。 該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。 RAMOS細(xì)胞來源于一位3歲的白人Burkitt's淋巴瘤患者。RAMOS細(xì)胞EBV陰性，表達(dá)IL-4受體和低親和性IgE受體(CD23)；每個RAMOS細(xì)胞表面大約有1500個IL-4的結(jié)合位點。RAMOS細(xì)胞可分泌IgM，表達(dá)膜型和分泌型的免疫球蛋白。 |
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puro藥篩濃度 |
RAMOS-LUC細(xì)胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml，培養(yǎng)過程中可不用再添加puro，如若擔(dān)心抗性隨著傳代時間降低，可定期用0.2ug/ml濃度puro維持 |
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保藏機(jī)構(gòu) |
ATCC; CRL-1596 DSMZ; ACC-603 ECACC; 85030802 ECACC; 91030710 |
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細(xì)胞代數(shù) |
p3-p8 |
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生物安全等級 |
1 |
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細(xì)胞規(guī)格 |
1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管 |
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培養(yǎng)基 |
90%RPMI-1640+10% FBS+1%PS |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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凍存條件 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
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細(xì)胞貨期 |
現(xiàn)貨，1周左右 |
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發(fā)貨方式 |
復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） |
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供應(yīng)范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作
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T25瓶 |
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收貨處理 |
觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) |
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傳代密度 |
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法 |
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心3-5min分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 方法二：可選擇半數(shù)換液方式，半數(shù)培養(yǎng)基離心重懸后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
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注意事項
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懸浮細(xì)胞收貨注意事項： 1、收貨時需鏡下拍照（看密度、狀態(tài)） 2、靜置后需鏡下拍照（看整體密度） a.如密度50%以下，建議換液并豎瓶培養(yǎng) b.如密度50%-80%，建議換液培養(yǎng)，隔天觀察密度 c.如密度90%，建議傳代 3、換液及傳代處理前，培養(yǎng)瓶豎著放置至少半小時（使細(xì)胞沉到瓶底）；收集上清，必須將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基（70ml）全部收集！并用PBS（10ml）潤洗瓶底并收集！離心轉(zhuǎn)速為1000rpm，5min。 4.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 5.因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。 |
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凍存管 |
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收貨處理 |
收到細(xì)胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 |
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傳代密度 |
第二天換液并檢查細(xì)胞密度 |
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傳代比例 |
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
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傳代方法 |
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
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1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存。 2.為保證細(xì)胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 |
細(xì)胞凍存操作
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凍存液配方 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
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細(xì)胞密度 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例 |
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凍存方法 |
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
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注意事項 |
凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案 |
售后服務(wù)
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細(xì)胞予 |
1.細(xì)胞運輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。 |
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2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。 |
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3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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6.細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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細(xì)胞不予 |
1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。 |
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2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。 |
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6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
