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產品中心

  • B16F10-LUC/小鼠黑色素瘤細胞-熒光素酶標記)

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW-CC3777
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
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細胞培養操作

細胞名稱

B16F10-LUC/小鼠黑色素瘤細胞-熒光素酶標記

TW-CC3777

細胞品牌

通蔚生物

種屬來源

小鼠

組織來源

皮膚

生長特性

貼壁生長

細胞形態

上皮細胞樣混有梭形細胞

活性檢測報告

B16F10-LUC報告下載

細胞簡介

Luciferase B16-F10細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩定,培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。B16-F10細胞是B16-F0細胞的亞系。

puro藥篩濃度

B16F10-LUC細胞puro藥篩濃度為1. 0ug/ml,培養過程中可不用再添加puro,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持

細胞代數

p3-p8

生物安全等級

1

細胞規格

1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管

保藏機構

ATCC; CRL-6475

培養基

90% 1640+10% FBS+PS

培養條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細胞貨期

現貨,1周左右

發貨方式

復蘇發貨(T25瓶免運輸費用)/  凍存發貨(需加干冰運輸費用)

供應范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用


細胞培養操作

T25瓶

收貨處理

觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h,以便穩定細胞狀態

傳代密度

細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

c、按6-8 mL/瓶補加培養基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。

d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養( 第一次傳代建議一個滿的T25傳一個10cm或者2個T25)。

注意事項

1.運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。

2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。

凍存管

收貨處理

收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇

傳代密度

第二天換液并檢查細胞密度

傳代比例

一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶

傳代方法

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。


注意事項

1.收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存。

2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。


細胞凍存操作

凍存液配方

無血清凍存液,液氮儲存

細胞密度

待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例

凍存方法

a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項

凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


售后服務

細胞予
重發

1.細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。

2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發

3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發

4.常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發

5.常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發

6.細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發

細胞不予
重發

1.客戶操作造成細胞污染,不重發

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發

3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發

4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發

5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發

6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發

特別說明

上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。

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