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021-54845833/15800441009
細胞基本信息
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細胞名稱 |
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貨 號 |
TW-CC3770 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
臍靜脈 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細胞形態 |
內皮細胞樣 |
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細胞簡介 |
Luciferase HUVEC細胞穩定表達螢光蛋白。該細胞株性狀穩定，培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢光蛋白活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。HUVEC-GFP細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。HUVEC細胞來源于人靜脈內皮，可在半固體培養基中形成克隆，在免疫抑制小鼠中不能形成腫瘤 |
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特別注意 |
1、HUVEC細胞為穩定轉染GFP的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其GFP熒光強度會逐漸減弱。 2、若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選，可定期用1.0ug/ml濃度puro維持。若無細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2.0ug/ml puro的完全培養基繼續篩選，以此類推，至最高藥物濃度為5.0ug/ml。若篩選過程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度puro進行篩選。當加入5.0 ug/ml puro時細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養基正常培養。 3、建議收到HUVEC-GFP細胞后至少傳3代，凍存留種后再進行篩選。 |
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細胞代數 |
10代以內 |
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生物安全等級 |
1 |
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細胞規格 |
1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管 |
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培養基 |
內皮細胞專用培養基 |
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培養條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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凍存條件 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
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細胞貨期 |
現貨，1周左右 |
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發貨方式 |
復蘇發貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
細胞培養操作
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T25瓶 |
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收貨處理 |
觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h，以便穩定細胞狀態 |
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傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養 |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法 |
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，棄去消化液，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-3 min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，加少量培養基終止消化。 c、按6-8 mL/瓶補加培養基，輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。 d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 |
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注意事項
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1.運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。 |
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凍存管 |
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收貨處理 |
收到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇 |
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傳代密度 |
第二天換液并檢查細胞密度 |
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傳代比例 |
一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶 |
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傳代方法 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
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1.收貨時若發現干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存。 2.為保證細胞的高存活率，收到產品后，請立即解凍復蘇細胞。 |
細胞凍存操作
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凍存液配方 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
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細胞密度 |
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例 |
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凍存方法 |
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
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注意事項 |
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案 |
售后服務
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細胞予 |
1.細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。 |
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2.收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。 |
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3.收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。 |
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4.常溫發貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。 |
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5.常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染，經核實后，重發。 |
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6.細胞活性問題，請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。 |
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細胞不予 |
1.客戶操作造成細胞污染，不重發。 |
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2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。 |
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3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。 |
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4.細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。 |
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5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。 |
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6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
