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  • RKO-LUC-EGFP/人結腸腺癌細胞-熒光素酶標記-綠色熒光標記(STR鑒定正確)

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW-CC3722
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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細胞基本信息

細胞名稱

RKO-LUC-EGFP/人結腸腺癌細胞

TW-CC3722

細胞品牌

通蔚生物

種屬來源

組織來源

結腸

生長特性

貼壁生長

細胞形態

上皮細胞樣

細胞簡介

Luciferase RKO細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩定,培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。RKO細胞是一個低分化的結腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型p53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRβ1)。RKO細胞的p53蛋白的水平高于RKO-E6細胞,RKO細胞是RKO-E6細胞和RKO-AS45-1細胞的親本細胞系。RKO細胞在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。

注意事項

RKO-LUC-EGFP細胞經過常溫運輸后,細胞狀態會改變,例如細胞縮起或者脫落,也會有部分細胞死亡,屬于正常現象,請收到細胞后放培養箱過夜穩定

細胞代數

10代以內

生物安全等級

1

細胞規格

1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管


保藏機構

ATCC; CRL-2577

培養基

90%MEM+10%FBS+PS

培養條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細胞貨期

現貨,1周左右

發貨方式

復蘇發貨(T25瓶免運輸費用)/  凍存發貨(需加干冰運輸費用)

供應范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用


細胞培養操作

T25瓶

收貨處理

觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h,以便穩定細胞狀態

傳代密度

細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗RKO-luc-EGFP細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化2-5 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml完全培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。

c、將RKO-luc-EGFP細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。

注意事項

1.運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。

2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。

凍存管

收貨處理

收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇

傳代密度

第二天換液并檢查細胞密度

傳代比例

一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶

傳代方法

將含有1 mLRKO-luc-EGFP細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養基,培養過夜)第二天換液并檢查RKO-luc-EGFP細胞密度。


注意事項

1.收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存。

2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。


細胞凍存操作

凍存液配方

無血清凍存液,液氮儲存

細胞密度

待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例

凍存方法

a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項

凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


售后服務

細胞予
重發

1.細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。

2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發

3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發

4.常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發

5.常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發

6.細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發

細胞不予
重發

1.客戶操作造成細胞污染,不重發

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發

3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發

4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發

5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發

6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發

特別說明

上海通蔚生物客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以撥打免費服務電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。

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