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021-54845833/15800441009
細胞基本信息
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名 稱 |
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貨 號 |
TW-CC3483 |
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品 牌 |
通蔚生物 |
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細胞規(guī)格 |
100μl |
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儲 存 |
-20℃ |
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抗性 |
無抗 |
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培養(yǎng)基 |
YPDA |
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菌株類別 |
酵母菌 |
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培養(yǎng)條件 |
28℃，有氧，YPDA |
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基因型 |
“MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δgal80Δ,LYS2:: GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3,MEL1GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2URA3:: MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ" |
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質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 |
電激 |
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保存方式 |
30%甘油，-20℃ |
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基本應(yīng)用 |
酵母雙雜交 |
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菌株簡介 |
" AH109菌株來源于PJ69-2A 酵母菌株，將lacZ報告基因引入PJ69-2A誕生了AH109，此菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株Y187通過mating操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker為: trp1, leu2，報告基因為：lacZ, HIS3, ADE2, MEL1。AH109 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標志為TRP1，用于表達DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒PGADT7的篩選標志為LEU，用于表達AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4系統(tǒng)原理：一個完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結(jié)構(gòu)域：位于N端1 ~ 174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域（DNA-BD）和位于C端768 ~881 位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并與之結(jié)合。而AD可以啟動UAS下游的基因進行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨存在不能激活轉(zhuǎn)錄，但當二者接近時，則呈現(xiàn)完整的GAL4活性，使含有UAS的啟動子下游基因轉(zhuǎn)錄表達。正常條件下，BD不與AD結(jié)合，將要檢測的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合，形成 bait 融合蛋白（bait -BD）和 prey 融合蛋白（prey-AD），如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用，就會促使 BD 和 AD 的相互接近，形成完整的GAL4，從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。AH109有四個報告基因：lacZ, HIS3, ADE2, MEL1，分別由三種不同的啟動子（GAL1，GAL2，MEL1）啟動，這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同，其余部分均不同，大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。" |
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供應(yīng)范圍 |
僅供限于科研實驗研究 |
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運輸方式 |
低溫快遞運輸 |
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菌株優(yōu)勢 |
通蔚生物菌株庫擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致 |
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特別說明 |
細胞購買/細胞培養(yǎng)/動物血清/實驗服務(wù)/原代提取/菌株購買，請立即與通蔚生物聯(lián)系 |
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售后服務(wù) |
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細胞予重發(fā) |
1.細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。 |
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2.收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。 |
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3.收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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4.常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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5.常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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6.細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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細胞不予重發(fā) |
1.客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。 |
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2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4.細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。 |
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6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話021-54845833/15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
