磷酸葡萄糖變位酶(PGM)試劑盒分光法/48樣
測(cè)定規(guī)格:48樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
磷酸葡萄糖變位酶(PGM)在碳水化合物代謝中起關(guān)鍵作用,并廣泛存在于所有生物體中。PGM 可使葡萄糖-1-磷酸(G1P)和葡萄糖-6-磷酸(G6P)互變。當(dāng)糖原分解時(shí),PGM將 G1P 轉(zhuǎn)化為 G6P,接著進(jìn)入糖酵解途徑產(chǎn)生 ATP,也可通過戊糖磷酸途徑產(chǎn)生核糖和NADPH。相反,當(dāng)細(xì)胞需要能量時(shí) PGM 將 G6P 轉(zhuǎn)化為 G1P,進(jìn)而產(chǎn)生糖原。PGM 的缺乏可導(dǎo)致與葡萄糖存儲(chǔ)相關(guān)的疾病。本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單,靈敏,快速的測(cè)定方法:PGM 將葡萄糖-1-磷酸轉(zhuǎn)化為葡萄糖-6-磷酸;葡萄糖-6-磷酸通過葡萄糖-6-磷酸脫氫酶氧化形成 NADPH,接著與特異顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì),通過檢測(cè)該有色物在 450nm 的增加速率,進(jìn)而計(jì)算出 PGM 酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍。
磷酸葡萄糖變位酶(PGM)活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(1nmol/μL):向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 0.6mL 蒸餾水(母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存)。
2. 把母液稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 nmol/μL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 依據(jù)加樣表操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。