Caspase-3活性測(cè)定試劑盒分光法/24樣
測(cè)定規(guī)格:48樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Caspase-3 又稱 CPP32、Yama 或 apopain,屬于 CED-3 亞家族,是細(xì)胞凋亡過(guò)程中的一個(gè)關(guān)鍵酶。利用Caspase-3分解底物Ac-DEVD-pNA產(chǎn)生黃色的對(duì)硝基苯胺(pNA),后者在405nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率即可得出 Caspase-3 酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、天平、
研缽、冰和蒸餾水。
Caspase-3 活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μmol/mL):臨用前甩幾下或離心,使粉體落入底部,加入 0.5mL乙醇,渦旋震蕩溶解后再加入0.5mL 的蒸餾水混勻,得到 10μmol/mL 備用。
2. 用蒸餾水把母液稀釋成以下濃度:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1μmol/mL。也可根據(jù)實(shí)際來(lái)調(diào)整濃度。
3. 80μL 標(biāo)準(zhǔn)品+620μL 試劑一,混勻后于 405nm 處讀取 A 值,依據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。