測定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
磷酸轉乙酰酶(PTA,EC 2.3.1.8)是與乙酸代謝相關的關鍵酶之一。磷酸轉乙酰酶(PTA)催化輔酶 A 和乙酰磷酸反應生成乙酰輔酶 A 和無機磷,通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來測定 PTA 酶活性大小。
反應式:CoA+acetyl phosphate?acetyl-CoA+phosphate。
[注]:全程操作需無磷環(huán)境;試劑配置最好用新的槍頭和玻璃移液器等,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺式離心機、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
磷酸轉乙酰酶(PTA)活性測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
標準曲線制作過程:
1. 制備標準品母液(50μmol/mL):標準品用1mL 試劑一溶解。(母液需在兩天內用)。
2. 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. μmol/mL。也可根據(jù)實際樣本來調整標準品濃度。
3. 依據(jù)顯色反應階段測定管的加樣體系操作,根據(jù)結果即可制作標準曲線。