幾丁質外切酶試劑盒分光法/24樣
測定規格:24樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產品簡介:
多種微生物、動物、植物等都可產生幾丁質酶,高等植物本身不存在作為真菌細胞壁組分之一的幾丁質,但當植物受到病原菌感染時,幾丁質酶活性迅速提高。因此該酶與植物對病原微生物的抗性有關,是重要的病程相關蛋白。
幾丁質酶主要水解幾丁質多聚體中β-1,4-糖苷鍵。依據水解位置的不同可分為幾丁質內切酶和幾丁質外切酶,幾丁質外切酶作用于幾丁質后,生成 N-乙酰氨基葡萄糖單體,進一步與鐵氰化鉀反應,于 420nm 處檢測,進而計算得到幾丁質外切酶活性大小。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標準品:0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1mg/mL。
3. 依據第④步驟的加樣體系:360μL 標準品+480μL 試劑六,混勻,95-100℃煮沸 10min,取全部液體至 1mL 比色皿中于 420nm 處讀取各管吸光值 A,標準品的質量作為橫坐標,0 mg/mL 對應的 A值減去各濃度標準品對應的 A 之差作為縱坐標,即可得出標準曲線。
測定規格:24樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
多種微生物、動物、植物等都可產生幾丁質酶,高等植物本身不存在作為真菌細胞壁組分之一的幾丁質,但當植物受到病原菌感染時,幾丁質酶活性迅速提高。因此該酶與植物對病原微生物的抗性有關,是重要的病程相關蛋白。
幾丁質酶主要水解幾丁質多聚體中β-1,4-糖苷鍵。依據水解位置的不同可分為幾丁質內切酶和幾丁質外切酶,幾丁質外切酶作用于幾丁質后,生成 N-乙酰氨基葡萄糖單體,進一步與鐵氰化鉀反應,于 420nm 處檢測,進而計算得到幾丁質外切酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、天平、水浴鍋、低溫離心機、鹽酸。
幾 丁 質 外 切 酶 活 性 測 定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
標準曲線制作過程:
1. 制備標準品母液(1mg/mL):標準品臨用前加 2mL 蒸餾水,即為 1mg/mL。2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標準品:0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1mg/mL。
3. 依據第④步驟的加樣體系:360μL 標準品+480μL 試劑六,混勻,95-100℃煮沸 10min,取全部液體至 1mL 比色皿中于 420nm 處讀取各管吸光值 A,標準品的質量作為橫坐標,0 mg/mL 對應的 A值減去各濃度標準品對應的 A 之差作為縱坐標,即可得出標準曲線。