測定規格:48樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產品簡介:
普魯蘭酶是一種水解酶,廣泛存在于微生物及動物、植物體內,能專一地分解淀粉和糖原及其衍生物分枝點的α-1.6-葡萄糖昔鍵。它的這種特性最早被用于淀粉結構的理論研究,到七十年代,普魯蘭酶的應用已擴展到淀粉糖漿、啤酒和酒精生產等多個淀粉深加工領域,并逐步從實驗室階段走向工業化規模。普魯蘭酶催化普魯蘭分解產生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,經光譜掃描在 540nm 有特征光吸收,在一定范圍內 540nm 光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算普魯蘭酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
普魯蘭酶活性測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
標準曲線制作過程:
1. 制備標準品母液(5mg/mL):向標準品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水(母液需在兩天內用且-20℃保存)。
2. 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 1, 2, 3, 4, 5. mg/mL。也可根據實際樣本來調整標準品濃度。
3. 按照:20μL 標準品+100μL 蒸餾水+100μL 試劑三,95℃水浴 10min,冷卻后,再加500μL 蒸餾水,混勻,全部液體轉移至 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,540nm 下測定,根據結果即可制作標準曲線。