乙二醛酶Ⅱ(Gly II)活性測(cè)定試劑盒分光法/24樣
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
測(cè)定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
乙二醛酶系統(tǒng)是甲基乙二醛(MG)的主要清除途徑,乙二醛酶Ⅱ(GlyⅡ,EC 3.1.2.6)是乙二醛酶系統(tǒng)中的一種酶。在哺乳動(dòng)物,植物和細(xì)菌中普遍表達(dá)。乙二醛酶Ⅱ催化 S-D-乳酰谷胱甘肽(S-D-lactoylglutathione, SLG)水解為還原型谷胱甘肽(GSH)和 D-乳酸。還原型谷胱甘肽(GSH)與 DTNB 與反應(yīng)生成黃色復(fù)合物,該有色物 質(zhì)在 412nm 處有特征吸收峰;通過檢測(cè) 412nm 處上升速率,進(jìn)而得出乙二醛酶Ⅱ(GlyⅡ)酶活性的大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、低溫離心機(jī)、研缽、蒸餾水。
乙二醛酶Ⅱ(GlyⅡ)活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μmol/mL):標(biāo)準(zhǔn)品溶于 1mL 蒸餾水中,(母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存)。
2. 把母液用蒸餾水稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5. μmol/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 依次在 EP 管中加入 100μL 標(biāo)準(zhǔn)品+590μL 試劑一+20μL 試劑二,混勻后靜置 5min 后全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,于 412nm 讀值,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。