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021-54845833/15800441009
簡 介：
使用強有力的偶聯技術將磁珠粒子表面全部用于結合天然的鏈霉親和素，提高生物素標記分子的捕捉能力和降低背景信號。結合的鏈霉親和素磁珠表面具有更高的功能穩定和更優良的均勻性。磁珠表面擁有一層具有很強鍵合能力的鏈霉親和素，同時具有優異的可重復性。具有高效的液相反應動力學特性。磁珠粒徑1000nm。由聚苯乙烯包覆。本公司提供不同包裝規格的產品1mL、5mlL、20mL。固含量為10mg/ml。
儲 存：
懸浮于10mM pH7.4的PBS緩沖液中 其中（0.02% Proclin300，0.02% Tween 20），2-10℃保存，保質期為18個月。儲存時磁珠容器要豎直存放，保證沉降下來的磁珠被溶液保護，防止粘附在管壁上面的磁珠失水，磁珠生物活性下降。避免冰凍，冰凍后可能造成磁珠活性下降。1mg鏈霉親和素磁珠可結合 1000 pmoles游離生物素400 pmoles生物素化寡核苷酸15ug生物素化抗體。雙鏈DNA結合情況與片段長度有關。
原 理：
鏈霉親和素偶聯的磁珠作為固相基質可簡便快捷、有效地與許多生物素化復合物結合，如小分子肽類、蛋白、抗體、糖類、凝集素、寡合核苷酸DNA/RNA等，因而其可用于分子與免疫診斷、細胞分選、cDNA表達文庫的建立和藥物篩選等。
注 意：
鏈霉親和素磁珠結合能力與特定靶分子的大小有關。確保樣品中無過量的游離生物素存在，因為游離生物素比大分子量的靶分子更容易與鏈霉親和素結合。生物素化引物擴增的PCR產物溶液中，盡量去除游離生物素化引物，然后與磁珠結合，因為生物素標記的引物比帶生物素的DNA片段更容易與磁珠結合。去除生物素化引物可以通過超濾法、微透析法，一般的DNA純化回收也是可以的去除生物素標記的引物。
建議每次應用中，磁珠的用量應通過滴定法進行優化，配體分子的大小和生物素化程度均可能影響二者結合能力。磁珠與生物素化配體的比例會直接影響整個實驗結果，磁珠數量恒定下，生物素化配體在較低溶度情況下，隨著生物素化配體溶度的增加，磁珠與配體結合后，其具有的配體結合靶物質能力提高，但是超過飽和吸附后，生物素化配體增加，不能提高磁珠配體結合體的與靶物質結合能力。
生物素化配體的制備，推薦使用如Pierce 或 Sigma生產的生物素化試劑。不同的功能集團：胺類、巰基羧基碳水化合物、酪氨酸和組氨酸側鏈、胍、胞嘧啶堿基都可以用生物素標記。生物素化過程中可能造成靶分子的活性喪失，需要根據具體應用避免。在DNA合成過程中一般是在寡核苷酸引物5’端標記生物素，用Pierce或Sigma的biotin-X-NHS Ester可以將蛋白質生物素化。當磁珠與配體結合后，用配體去捕獲目標物，需要保證靶物質游離在溶液中，而且與配體結合的位點裸露在外面。
操作步驟（供參考）：
磁珠準備
1、使用前渦旋均勻（也可采用超聲分散，將試管小心放入普通超聲波清洗器中，超聲3min左右），用移液器取需要量的磁珠到一離心管中。
2、離心管置于磁力架中約1分鐘左右可完成分離。用移液器移除液體。
3、加入特定實驗的洗滌液體，試管蓋好，漩渦震蕩混勻。然后磁分離移除液體。
4、重復1~2次洗滌步驟，并將磁珠懸浮于適量溶液。
做抗體或蛋白相關實驗前可采用PBS或生理鹽水緩沖溶液洗滌SA磁珠2~3遍；做核酸相關實驗前應使用1× B&W Buffer洗滌至少3遍后使用。2× B&W Buffer：10mM Tris-Hcl(pH7.5) 1mM EDTA 2M NaCl。本產品未添加核糖核酸酶，做RNA相關實驗前應做去除RNase處理，RNA實驗：使用溶液A（A液：DEPC-treated 0.1M NaOH DEPC-treated 0.05M NaCl）洗滌SA磁珠兩次，每次2min，再用溶液B （DEPC-treater 0.1M NaCl）洗滌一次，最后將SA磁珠懸浮于B液中。
與生物素化配體結合：
鏈霉親和素磁珠與Biotin-Antibody或Biotin- Peptides的結合：
1、計算磁珠和生物素化抗體所需用量。每mg鏈霉親和素磁珠最大量結合15ug 抗體或300pmol生物素化多肽，通常不需要加入飽和抗體/多肽。
2、懸浮磁珠后和生物素化抗體在室溫下孵育30分鐘，旋轉混勻。
3、孵育后，離心管置于磁力架2分鐘，移除上清。
4、用PBS/BSA洗滌磁珠4-5次。
5、懸浮磁珠稀釋至所需濃度，用于下游實驗。
鏈霉親和素磁珠與核酸的結合：
1、取適量洗滌好的磁珠。
2、用2xB&W緩沖液懸浮磁珠使終濃度為1ug/ul或實驗的適宜濃度。
3、加等體積的生物素化DNA/RNA 溶液。
4、室溫下，旋轉或輕敲離心管混合。30bp左右片段孵育10分鐘左右，1kb左右片段孵育15分鐘。
5、孵育后，將離心管放在磁力架上1到2分鐘，并移除液體。
6、用1xB&W緩沖液洗滌磁珠2-3次。
8、最后用適宜的溶液懸浮磁珠，表面結合了核酸片段的磁珠，用于進行下游實驗。
鏈霉親和素磁珠與抗體蛋白以及核酸的解離：
抗體/蛋白分離：將結合后的磁珠重懸于0.1% SDS中，置于95℃左右水中5分鐘。
注意：這樣可能導致蛋白活性下降。核酸分離：用PH8.0的TE溶解，95℃溫浴5分鐘，可以解離約98%的核酸。
