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品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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產(chǎn)品中心

  • 肺孢子蟲(chóng)通用PCR試劑盒

    規(guī)格:
    數(shù)量:

    購(gòu)買(mǎi)數(shù)量

    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW38757
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
  • 商品詳情
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  • 說(shuō)明書(shū)下載
  • 商品評(píng)論0
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產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專(zhuān)一性強(qiáng),只擴(kuò)增肺孢子蟲(chóng)通用,與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號(hào)

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

肺孢子蟲(chóng)通用 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

肺孢子蟲(chóng)通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊(cè)

1 份

運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品DNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 肺孢子蟲(chóng)通用 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系):
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品,在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照,故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對(duì)照

PCR陽(yáng)性對(duì)照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

肺孢子蟲(chóng)通用PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對(duì)照(水)

--

18μL

--

PCR 陽(yáng)性對(duì)照(肺孢子蟲(chóng)通用PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):

過(guò)程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)35個(gè)循環(huán)

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測(cè):
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產(chǎn)品,僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
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