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品質保證 · 通蔚試劑

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產品中心

  • 豬圓環病毒通用PCR試劑盒

    規格:
    數量:

    購買數量

    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW38061
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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豬圓環病毒(Porcine Circovirus,PCV)有 PCV-1 和 PCV-2 兩種型,其基因組為單鏈 DNA,長度分別為 1759nt 和 1768nt,其同源性低于 80%,但基因組結構相似。PCV-1 無致病性,廣泛存在于豬體內。PCV-2 對豬具有較強的易感性,感染豬可自鼻液、糞便等廢物中排出病毒,經口腔、呼吸道途徑感染不同年齡的豬。感染病毒后的病豬最常見的癥狀是豬只漸進性消瘦或生長遲緩,這也是診斷所必需的臨床依據,其他癥狀有厭食、精神沉郁、行動遲緩、皮膚蒼白、被毛蓬亂、呼吸困難,咳嗽為特征的呼吸障礙,較少發現的癥狀為腹瀉和中樞神經系統紊亂,一旦感染該病毒,發病率一般很低而病死率都很高,對養豬業帶來較大的經濟損失,因此快速檢測豬圓環病毒具有重要意義。本產品是根據 PCR 原理開發檢測豬圓環病毒通用的試劑盒。
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增豬圓環病毒通用,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規格及成分:

編號

成分

規格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

豬圓環病毒通用PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

豬圓環病毒通用PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 豬圓環病毒通用 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個樣品管

PCR 陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

豬圓環病毒通用PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR 陽性對照(豬圓環病毒通用型)PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR 反應35個循環

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產品,僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
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