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2V6.11人胚腎細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人胚腎細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ：2V6.11
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ：貼壁細(xì)胞
完全培養(yǎng)基 ：M EM （含N EA A ）(PM 150410)＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ：1~ 2分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:2-1:4
細(xì)胞背景描述
2V6.11細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293 [H EK -293]衍化而來(lái)，293[H EK -293]細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pV gR X R 轉(zhuǎn)染得到293pV gRX R細(xì)胞。隨后，用包含編碼E4 24K 的A d5 E4O RF6基因的質(zhì)粒pEK O RF6轉(zhuǎn)染。pEK O RF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndH ydro衍生而來(lái)，載體包含SV 40病毒序列。2V 6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V 6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E4 34K D a蛋白可通過(guò)免疫印跡法檢測(cè)；2V 6.11細(xì)胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。
供體年齡 ：男
組織來(lái)源 ：腎；用腺病毒5(A d5)D N A 轉(zhuǎn)化；用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒D N A 轉(zhuǎn)染
細(xì)胞類型 ：轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
細(xì)胞保藏中心 ：ATCC ; C RL-2784A TC C ; JH U -67
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面， 顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟代理商或我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。
