2V6.11人胚腎細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :人胚腎細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 :2V6.11
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
生長特性 :貼壁細(xì)胞
完全培養(yǎng)基 :M EM (含N EA A )(PM 150410)+10% F B S(164210-50)+1%P /S(P B 180120)
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 :1~ 2分鐘
換液頻次 :2~ 3次/周
傳代比例(密度) :1:2-1:4
細(xì)胞背景描述
2V6.11細(xì)胞是2001年從人胚腎細(xì)胞株293 [H EK -293]衍化而來,293[H EK -293]細(xì)胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pV gR X R 轉(zhuǎn)染得到293pV gRX R細(xì)胞。隨后,用包含編碼E4 24K 的A d5 E4O RF6基因的質(zhì)粒pEK O RF6轉(zhuǎn)染。pEK O RF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndH ydro衍生而來,載體包含SV 40病毒序列。2V 6.11細(xì)胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V 6.11細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)的人腺病毒E4 34K D a蛋白可通過免疫印跡法檢測;2V 6.11細(xì)胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。
供體年齡 :男
組織來源 :腎;用腺病毒5(A d5)D N A 轉(zhuǎn)化;用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒D N A 轉(zhuǎn)染
細(xì)胞類型 :轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
細(xì)胞保藏中心 :ATCC ; C RL-2784A TC C ; JH U -67
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面, 顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時跟代理商或我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。