NK-92MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
基本信息
產品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
細胞簡稱 : N K-92M I
細胞別稱 : N K-92M I;N K-92mi;N K 92-M I;N K92M I;N K -92 transfected withM FG-Hil2
細胞形態 : 淋巴母細胞樣
生長特性 : 懸浮細胞
培養環境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 90% FBS+ 10% DM SO液氮
完全培養基 : M EM α(PM 150422)+0.2mM Inositol+0.1mM β-m ercaptoethanol(P B 180633)+0.02m M FolicAcid+12.5%H S(164215)+12.5% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
可通過補充新鮮培養基或者離心換液兩種方式維持培養,離心轉速參考1200 rpm (250g左右),離心3分鐘
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 5×10^ 5-1×10^ 6cells/m L
收貨注意事項 : N K-92M I常溫細胞收貨注意事項
1. 細胞剛收到后細胞先豎立著靜置 2~ 4個小時,讓細胞沉降到底部。
2. 細胞靜置完后把瓶中培養基上面部分培養基小心吸出,留底部細胞和3ml左右培養基在原瓶。
3. 吸出的細胞離心收集細胞沉淀,離心轉速1200轉3分鐘,或者根據您的離心機實際情況而定。
4. 將得到的細胞沉淀用該細胞。
對應的完培重懸后放回原瓶繼續培養過夜,一個T25最終培養體積是5~6毫升。
5. 我們出廠的培養瓶為不透氣瓶蓋,一定要擰松到不掉的程度,使細胞透氣。
6. 培養瓶橫放瓶口擰松透氣培養過夜。
7. 第二天視細胞密度和培養基消耗情況進行分瓶,可以不離心。
細胞背景描述
N K -92細胞是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細胞衍生來的一株IL-2依賴型N K 細胞株。N K -92M I細胞是轉染得到的源自N K -92細胞的IL-2非依賴的N K 細胞株。親本細胞N K -92通過微粒體基因轉化法用逆轉錄病毒M FG -hIL-2載體攜帶的人IL-2cDN A 進行轉化。可能由于載體整合到基因組D N A 中,轉化是穩定的。這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性;鉻釋放試驗顯示它能殺死K562細胞和D audi細胞。N K -92細胞有以下特征:C D 2、C D 7、C D 11a、CD 28、CD 45、CD 54表面標記陽性;CD 1、CD 3、CD 4、CD 5、CD 8、CD 10、CD 14、CD 16、CD 19、CD 20、CD 23、CD 34和H LA-D R表面標記陰性。其親本IL-2依賴的細胞株N K -92細胞及另一株同樣來源于N K -92細胞株的IL-2非依賴的細胞株N K -92C I都可從A TC C 得到。NK -92M I細胞和N K -92C I細胞這兩個變種都包含、表達并合成hIL-2cDN A。N K-92M I細胞合成的IL-2水平比N K -92C I高,而親本細胞不合成表達。1998年9月提交到A T C C 的培養物污染了支原體,其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周,用H oechst染色、PC R 和標準培養測試進行支原體檢測,結果都呈陰性。
供體年齡 : 男性,50歲
組織來源 : 外周血
細胞類型 : 腫瘤細胞
腫瘤類型 : 淋巴瘤細胞
生物安全等級 : 2
細胞保藏中心 : ATCC ; C R L-2408
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養操作指南
1. 收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片 將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5. 若觀察到異常或者對細胞有疑問,請及時跟我們聯系;對于細胞培養操作及培養。可跟我們的技術支持交流。
售前須知
該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。