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NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ： 通蔚生物
中文名稱 ： 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 ： N CI-H 446[H 446]
細(xì)胞形態(tài) ： 上皮細(xì)胞樣
生長特性 ： 半貼半懸
培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO 液氮
完全培養(yǎng)基 ： RPM I-1640(P M 150110)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞，懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞，可用離心管收集細(xì)胞懸液后，于1200 rpm （250g左右）離心收集細(xì)胞。
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸浮。
3、 貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤洗后，在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED T A ）置于 37℃培養(yǎng)箱中消化，待細(xì)胞變圓收縮后可用4~ 6 m L左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化，輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞。
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時間 ： 1~ 2分鐘
換液頻次 ： 2~ 3次/周
傳代比例（密度） ： 1:3-1:4
細(xì)胞背景描述
N C I-H 446細(xì)胞是從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的，N C I-H 446細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。N C I-H 446細(xì)胞是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。N C I-H 446細(xì)胞內(nèi)左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測水平。C -m yc D N A 序列擴(kuò)增約20倍，c-m yc R N A 比正常細(xì)胞增加15倍。最初，傳代培養(yǎng)基用R PM I-1640(含5% 胎牛血清、10nM 氫化可的松、0.005m g/ml胰島素、0.01m g/ml鐵傳遞蛋白、10nM 17-β -雌二醇、30nM 亞硒酸鈉)。
供體年齡 ： 男；61歲
組織來源 ： 肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細(xì)胞肺癌
細(xì)胞類型 ： 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 ： 肺癌細(xì)胞
致瘤性 ： Yes,in nudemice (The cells fo rm tran splan tabletum orswith non-typical
SC LC histolo gy).
生物安全等級 ： 1
細(xì)胞保藏中心 ： ATCC ; H TB-171
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對細(xì)胞有疑問，請及時跟我們聯(lián)系；對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。
