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  • NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW34942
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
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NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
中文名稱 : 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 : N CI-H 23
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
生長特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 : RPM I-1640(P M 150110)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)

傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 : 2~ 3分鐘
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 1:3-1:4

細(xì)胞背景描述 
N C I-H 23細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織,表達(dá)C -m yc、L-m yc、v-src、v-abl、v-erb B 、c-raf1、H a-ras、Ki-ras、N -rasRN A s;N C I-H 23細(xì)胞攜帶K -ras12突變;p53基因246位密碼子突變A TC →A TG ;表達(dá)PD G F A 和B鏈的異源mRN A ;表達(dá)TG Fα、TG Fβ和EG FR;角蛋白5、8和18陽性,波形蛋白陽性,神經(jīng)絲蛋白陰性,左旋多巴脫氫酶陰性;據(jù)報道,N C I-H 23細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆的效率為9.7%。
倍增時間 : ~38 hours
供體年齡 : 男;51歲
組織來源 : 肺
細(xì)胞類型 : 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 : 肺癌細(xì)胞
基因表達(dá) : m yc+;src +;abl+;erb +;ras+;sis-
生物安全等級 : 1
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ;  C R L-5800

收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用
基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對細(xì)胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。

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