產品簡介
產品名稱 :小鼠胃平滑肌細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :胃組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織。胃柔軟,活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞,充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體(胃底腺、賁門腺、幽門腺) ,它們的分泌物混合形成胃液,對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環狀的皺襞叫幽門瓣。
胃肌膜由三層平滑肌構成,外層縱形,中層環形,內層斜行,其中環形肌最發達,在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層,細胞通過緊密連接,進行同步性運動,完成肌肉的舒縮活動,以推動食物前進,完成對食物的機械性消化,并促進化學性消化和吸收。
胃平滑肌具有肌組織的共同特性,如興奮、自律性、傳導性和收縮性,在離體后,置于適宜的環境內,仍能進行良好的節律性運動,但其收縮很緩慢,節律性遠不如心肌規則。胃平滑肌對電刺激較不敏感,但對于牽張、溫度和化學刺激則特別敏感,輕微的刺激常可引起強烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環境分不開的,胃內容物對平滑肌的牽張、溫度和化學刺激是引起內容物推進或排空的自然刺激因素。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳1-2代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
小鼠胃平滑肌細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠胃平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳1-2代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。