產品簡介
產品名稱 : 大鼠骨髓單個核細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 骨髓
產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠骨髓單個核細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。
出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是(m ononuclear cell)單個核細胞,而不是(M onocyte)單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與骨髓其他細胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影酸鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,可將各種血細胞與單個核細胞分離。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠骨髓單個核細胞采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠骨髓單個核細胞經過檢測,純度可達90% 以上,且不含有HIV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 半貼壁半懸浮
細胞形態 : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠骨髓單個核細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠骨髓單個核細胞是一種半貼壁半懸浮細胞,細胞形態呈圓形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.半貼壁半懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用吸管吸取PBS,吹洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液;經1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀①。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,收集細胞懸液至離心管中;經1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀②;
4) 吸取5ml新鮮完全培養基,重懸細胞沉淀①、細胞沉淀②,把①、②混勻。
5) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,按實驗需求接種于實驗器皿內,然后補充適量新鮮的完全培養基,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
6) 待細胞狀態穩定后,用于實驗;可以每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。