產品簡介
產品名稱 : 小鼠腸神經嵴干細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 腸組織
產品規格 : 5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠腸神經嵴干細胞分離腸組織;神經嵴干細胞(neural crest stem cells,NCS C),即外周神經系統干細胞,起源于胚胎期的神經管背側,與中樞神經系統干細胞在形態學上有著顯著不同,NCSC可表達低親和力神經營養因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質細胞,而中樞神經系統干細胞與之恰好相反。
NCSC可在不同部位分化出多種組織,如神經元、神經膠質、黑色素細胞、內分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特異性分化出腸神經系統中神經元和神經膠質的NCSC,被稱為腸神經嵴干細胞(gut neural crest stemcells,GNCSC)。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞采用中性蛋白酶 - 膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×105 cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 : 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細胞形態 : 球形
傳代特性 : 可傳2-3代
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
小鼠腸神經嵴干細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠腸神經嵴干細胞是一種懸浮細胞,細胞形態呈球形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 懸浮細胞處理
1)收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀。
3)加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合適密度接種至培養器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。
5)加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6)待細胞狀態穩定后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。