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  • 大鼠羊膜間質細胞

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    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33676
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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產品簡介
產品名稱 : 大鼠羊膜間質細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 胎盤組織
產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡介
大鼠羊膜間質細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚 膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。

有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內層,與眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層。

羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠羊膜間質細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠羊膜間質細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息
培  養 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁 
細胞形態 : 成纖維細胞樣 
傳代特性 : 可傳3代左右 
傳代比例 : 1:2
消  化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠羊膜間質細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片

使用方法
大鼠羊膜間質細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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