購物車
幫助
021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ： 大鼠心臟微血管周細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 心臟組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠心臟微血管周細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜(房室瓣)，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。
心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等)，使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。
近年來大量研究表明，心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ： PLL(0.1m g/ml)
培 養 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 成纖維細胞樣
傳代特性 ： 可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠心臟微血管周細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠心臟微血管周細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3.細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm ，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液0.5m L至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min (4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml完全培養基終止消化。
3) 經1000rpm ，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養基(補加1% FBS，促進貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基(37℃預熱)。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
