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產(chǎn)品中心

  • 大鼠胃平滑肌細(xì)胞

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    價(jià)格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW33646
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :大鼠胃平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來(lái)源 :胃組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠胃平滑肌細(xì)胞分離自胃組織;胃柔軟,活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,充盈時(shí)變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體(胃底腺、賁門(mén)腺、幽門(mén)腺),它們的分泌物混合形成胃液,對(duì)食物進(jìn)行化學(xué)性消化。粘膜在幽門(mén)處由于覆蓋幽門(mén)括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門(mén)瓣。

胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成,外層縱形,中層環(huán)形,內(nèi)層斜行,其中環(huán)形肌最發(fā)達(dá),在幽門(mén)處特別增厚形成幽門(mén)括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層,細(xì)胞通過(guò)緊密連接,進(jìn)行同步性運(yùn)動(dòng),完成肌肉的舒縮活動(dòng),以推動(dòng)食物前進(jìn),完成對(duì)食物的機(jī)械性消化,并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,如興奮、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性,在離體后,置于適宜的環(huán)境內(nèi),仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動(dòng),但其收縮很緩慢,節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對(duì)電刺激較不敏感,但對(duì)于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感,輕微的刺激常可引起強(qiáng)烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開(kāi)的,胃內(nèi)容物對(duì)平滑肌的牽張、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素。

方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。

質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁 
細(xì)胞形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣 
傳代特性 :可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠胃平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
大鼠胃平滑肌細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn);包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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