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產(chǎn)品中心

  • 小鼠腸道干細(xì)胞

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    價(jià)格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW33638
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱(chēng) : 小鼠腸道干細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
組織來(lái)源 : 腸組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介
小鼠腸道干細(xì)胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門(mén)至肛門(mén)的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便,再通過(guò)直腸經(jīng)肛門(mén)排出體外。

腸道堪稱(chēng)身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細(xì)胞(ISC )也稱(chēng)腸道上皮干細(xì)胞,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。

正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個(gè)遷移過(guò)程大約3-5d,在遷移過(guò)程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞。當(dāng)受到外界生理或病理信號(hào)作用時(shí),ISC 可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。

方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸道干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化后,用腸道干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。

質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸道干細(xì)胞經(jīng)M SI-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 懸浮
細(xì)胞形態(tài) : 球形
傳代特性 : 可傳2-3代左右
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
小鼠腸道干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
小鼠腸道干細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈球形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代左右;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.懸浮細(xì)胞處理
1)收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
3)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞;將分散好的細(xì)胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)若遇到懸浮細(xì)胞團(tuán)塊較大,無(wú)法機(jī)械吹散時(shí),向步驟2)中細(xì)胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細(xì)胞;1200rpm 離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
5)加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6)待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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